首頁(yè) > 優(yōu)秀范文 > 大二學(xué)習(xí)計(jì)劃
時(shí)間：2023-01-07 19:02:22
序論：速發(fā)表網(wǎng)結(jié)合其深厚的文秘經(jīng)驗(yàn)，特別為您篩選了11篇大二學(xué)習(xí)計(jì)劃范文。如果您需要更多原創(chuàng)資料，歡迎隨時(shí)與我們的客服老師聯(lián)系，希望您能從中汲取靈感和知識(shí)！
大二個(gè)人學(xué)習(xí)計(jì)劃范文1大學(xué)四年中，大二無(wú)疑是最關(guān)鍵的一年。從這一年開(kāi)始，大多數(shù)同學(xué)都有了比較清晰的學(xué)習(xí)進(jìn)程和相對(duì)穩(wěn)定的學(xué)習(xí)、生活態(tài)度。然而，除此之外，我們還應(yīng)將各部分做得更合理、完善;這樣才能順利地走下去。
對(duì)于學(xué)習(xí)，當(dāng)務(wù)之急就是為英語(yǔ)A級(jí)做好十分的準(zhǔn)備，若對(duì)自己要求更高，計(jì)劃就得更為精細(xì)、嚴(yán)密、合理。
主要內(nèi)容是：一，結(jié)合自身和客觀情況對(duì)所需的準(zhǔn)備量有大致的把握;
二，充分利用時(shí)間、認(rèn)真執(zhí)行學(xué)習(xí)計(jì)劃。
值得注意的是：由于剛接觸不久，我們對(duì)自己的專(zhuān)業(yè)課程還不是特別清楚，有的還產(chǎn)生了些許畏懼和慌忙感。因而，在心情相對(duì)平穩(wěn)的大二，著力培養(yǎng)對(duì)專(zhuān)業(yè)課程的興趣、學(xué)習(xí)方法，是很相宜的。我們還應(yīng)明白，無(wú)論什么事一上手時(shí)，總是有點(diǎn)陌生的、不安心的，后來(lái)慢慢熟悉了，很多道理也就在點(diǎn)點(diǎn)滴滴的領(lǐng)悟中明晰了。盡量克制、避免急噪、恐懼等不良情緒。
態(tài)度決定命運(yùn)，環(huán)境影響人生，這我們都聽(tīng)膩了，但沒(méi)幾個(gè)正確地看待它。
即將走出“象牙塔”的我們，身肩來(lái)自各個(gè)方面的責(zé)任。因而，在著、這特殊而寶貴的一年里，我們不能再像一個(gè)無(wú)知而任性的頑孩子，而應(yīng)該像許多成功的偉人年輕時(shí)候那樣，樹(shù)立宏大的奮斗目標(biāo)，踏踏實(shí)實(shí)地過(guò)好每一分鐘。不要以為這一分鐘很不好過(guò)，要知道;如果現(xiàn)在放縱自己懶散的習(xí)性，以后殘酷的現(xiàn)實(shí)會(huì)讓你更難過(guò)。再說(shuō)了，只要你現(xiàn)在花個(gè)一小時(shí)----哪怕10分鐘，真正去體味思考著的樂(lè)趣，相信你不久就會(huì)再次懷念那美妙的、無(wú)與倫比的愉悅。
思考就是生命，就是生活。
主觀、客觀因素往往制約著一個(gè)人的成功。所以，我們不可不談環(huán)境與自己的關(guān)系。對(duì)與我們來(lái)說(shuō)，與人交往是最為主要的、影響我們的外界條件。善于把握自己，與人交往的同學(xué)會(huì)從中享受到很多裨益;相反，那些平時(shí)慣于沉默、排外、極易失控的同學(xué)則會(huì)把它視為無(wú)底深淵，讓人沒(méi)完沒(méi)了地?zé)馈n(yōu)愁。我以為要搞好人際關(guān)系，首先你自己必須是一個(gè)性格明朗、講道理、負(fù)責(zé)任、心胸寬闊的人;其次，你還須明白沒(méi)有人是完美的，他們的所有品性皆由自然所造，也可為之所修。因此，我們應(yīng)學(xué)會(huì)用發(fā)展的眼光看待任何人。只要你夠真、夠純、夠味，總有一天，總有一個(gè)人會(huì)懂你，到那時(shí)你的天空將會(huì)出現(xiàn)一道微笑的彩虹。最后，把你和你的“視敵”看清楚，盡量緩和彼此間的矛盾，在沒(méi)找到解決問(wèn)題的途徑之前，周旋無(wú)不是最佳方案。
大二個(gè)人學(xué)習(xí)計(jì)劃范文2一、考試課、考查課的學(xué)習(xí)
這學(xué)期的考試課比上學(xué)期多，任務(wù)也加重了一點(diǎn)。我們現(xiàn)在學(xué)的知識(shí)偏文的多一些，對(duì)于我這個(gè)理科生來(lái)說(shuō)有一點(diǎn)困難，但困難是用來(lái)克服的，我相信我可以學(xué)好這些知識(shí)，只要我努力了，盜用一下李寧的廣告語(yǔ)：一切皆有可能。
二、通過(guò)英語(yǔ)四級(jí)考試
英語(yǔ)四級(jí)考是本學(xué)期的重點(diǎn)。我的英語(yǔ)基礎(chǔ)不太好，單詞量比較少，這可能會(huì)給我的考試帶來(lái)一定的困難，但是沒(méi)有困難何來(lái)挑戰(zhàn)、何來(lái)動(dòng)力，所以我要勇敢地迎接挑戰(zhàn)。于是我決定將這學(xué)期的主要精力放在英語(yǔ)學(xué)習(xí)上，每天抽出時(shí)間來(lái)背單詞、做試卷、聽(tīng)聽(tīng)力，提高我的英語(yǔ)成績(jī)。
特別是英語(yǔ)聽(tīng)力，在考試中占的分?jǐn)?shù)比例大，難度高，不能在一時(shí)間鍛煉出來(lái)，需要時(shí)間的積累，不斷地練習(xí)。所以我一定要在平時(shí)擠出聽(tīng)聽(tīng)力的時(shí)間，盡量把聽(tīng)力練好，多拿分?jǐn)?shù)。
三、通過(guò)電腦一級(jí)考試
對(duì)于電腦一級(jí)考試，我還是比較有信心的。雖然電腦水平不高，但一些基礎(chǔ)的東西還是可以的。所以我準(zhǔn)備把學(xué)校發(fā)的基礎(chǔ)題看一下，上機(jī)操作幾遍，熟悉一下操作平臺(tái)就差不多了。
四、體能鍛煉
在我們警校體能的要求非常高，體能的分?jǐn)?shù)在總成績(jī)里也占了很大的比例。這是一個(gè)不容忽視的環(huán)節(jié)。春天到了，正是鍛煉身體的好時(shí)機(jī)。一定要抓住這個(gè)時(shí)機(jī)，多去操場(chǎng)跑跑跳跳，活動(dòng)筋骨、強(qiáng)健體魄。
五、社團(tuán)活動(dòng)
上學(xué)期我加入了“心橋手語(yǔ)社”，這學(xué)期手語(yǔ)社會(huì)組織考“手語(yǔ)初級(jí)證書(shū)”。學(xué)手語(yǔ)，是我很早以前就有的夢(mèng)想，如今夢(mèng)想得以實(shí)現(xiàn)，我倍加珍惜。手語(yǔ)對(duì)我們以后的公安工作也有很大的幫助，有利于我們和聾啞人交流，方便工作地開(kāi)展。
我有信心能把這些計(jì)劃付諸實(shí)踐，努力，加油!
大二個(gè)人學(xué)習(xí)計(jì)劃范文31、努力把英語(yǔ)四級(jí)考出來(lái)。
2、把組織部的相關(guān)工作做好。
3、把專(zhuān)業(yè)知識(shí)學(xué)精，多學(xué)習(xí)一些柴油機(jī)方面的知識(shí)。
4、多學(xué)習(xí)一些船舶英語(yǔ)和日常交際英語(yǔ)。
5、多練習(xí)CAD，努力看懂圖紙。
6、學(xué)習(xí)一些管理，社交，金融，營(yíng)銷(xiāo)的知識(shí)。
7、把船舶鉗工拿下。
8、多學(xué)習(xí)一些會(huì)聲會(huì)影和PS等的軟件。
9、了解自己的專(zhuān)業(yè)趨向，找準(zhǔn)職位集中學(xué)習(xí)，了解理想的公司。
10、學(xué)習(xí)男生的氣質(zhì)和修養(yǎng)。
11、學(xué)習(xí)一些醫(yī)學(xué)常識(shí)。
12、每天一節(jié)網(wǎng)上公開(kāi)課。
大二個(gè)人學(xué)習(xí)計(jì)劃范文4時(shí)間總在不經(jīng)意間流逝，轉(zhuǎn)眼已是大二學(xué)期了，不能再盲目覺(jué)得自己是新生，要慢慢摸索大學(xué)之路該如何走，應(yīng)該有明確的計(jì)劃。
讀大學(xué)不再是讀課本的知識(shí)，要學(xué)的很廣泛。如自修之道、基本知識(shí)、實(shí)踐貫通、積極主動(dòng)、掌握時(shí)間，還有非常重要的一點(diǎn)就是為人處事。
要從思考中確立自我，學(xué)習(xí)中尋求真知，交流中鍛煉表達(dá)，交友中品味成熟，實(shí)踐中懂得價(jià)值，興趣中攫取快樂(lè)，最求中獲得力量。
大學(xué)是個(gè)廣闊的舞臺(tái)，其實(shí)每個(gè)學(xué)生都是主角。如何在這個(gè)舞臺(tái)上盡顯光彩：就需自修能力了。要學(xué)會(huì)挖掘合適的學(xué)習(xí)方法，舉一反三。這樣才能適應(yīng)瞬息萬(wàn)變的現(xiàn)代社會(huì)。這學(xué)期呢我有一些小安排：
第一是X月份的C語(yǔ)言考試，借助網(wǎng)絡(luò)和圖書(shū)館來(lái)復(fù)習(xí)準(zhǔn)備。
第二是X月份的英語(yǔ)四級(jí)和以上方法差不多，就加上每晚的一個(gè)聽(tīng)力小訓(xùn)練和單詞記憶。
相信每個(gè)專(zhuān)業(yè)的課程安排都有一定的科學(xué)依據(jù)，所以除其重點(diǎn)發(fā)展方向科目加強(qiáng)鉆研外其他基礎(chǔ)知識(shí)要做適當(dāng)?shù)牧私?，為以后工作生活奠定基礎(chǔ)。
死記硬背永遠(yuǎn)學(xué)不精，學(xué)不透。在實(shí)踐中學(xué)習(xí)，花一定時(shí)間來(lái)思考所學(xué)內(nèi)容間的聯(lián)系是很實(shí)用的。比如我們的音頻技術(shù)、網(wǎng)頁(yè)制作與網(wǎng)站建設(shè)還有上學(xué)期的Flash完全可以聯(lián)合起來(lái)學(xué)習(xí)，而這些操作性強(qiáng)的科目明顯需要勤加練習(xí)。我們的電腦已為我們提供了絕對(duì)的實(shí)踐可能。興趣是一切學(xué)習(xí)的動(dòng)力源泉。明確自己的興趣應(yīng)是每位學(xué)子的第一步。
除了自身感興趣的可以學(xué)習(xí)，還有興趣的培養(yǎng)。對(duì)那些想學(xué)而畏懼的學(xué)科就需培養(yǎng)興趣。比如計(jì)算機(jī)方面的東西我很感興趣可也很畏懼。所以我在一步步調(diào)整心態(tài)，讓興趣占領(lǐng)主導(dǎo)地位。韓語(yǔ)是我很想學(xué)的小語(yǔ)種，我也在計(jì)劃中慢慢自學(xué)。
積極主動(dòng)往往會(huì)贏得更多機(jī)會(huì)，不管是學(xué)習(xí)還是校園各種活動(dòng)，應(yīng)該適量參加，這是對(duì)自己最好的鍛煉機(jī)會(huì)，同樣是積極心態(tài)的激發(fā)點(diǎn)。所以盡量去參加一些有意義的活動(dòng)。時(shí)間永遠(yuǎn)是最寶貴的`。一寸光陰一寸金，又何止呢!愛(ài)睡懶覺(jué)是我浪費(fèi)時(shí)間的最大因素，此學(xué)期開(kāi)始我已在漸漸克服當(dāng)中。
大學(xué)就是一個(gè)小型社會(huì)。為人處世很重要，這也是我要重點(diǎn)學(xué)習(xí)的。在此我先要學(xué)的是寬容，這是我高三到現(xiàn)在一直追尋學(xué)習(xí)的，還沒(méi)有達(dá)到我想要的最佳狀態(tài)，所以還在繼續(xù)。還有就是與人交流，這是我最不擅長(zhǎng)的?，F(xiàn)在我在強(qiáng)迫著自己打破以前的心態(tài)，盡量去與人交流，從一個(gè)微笑，一聲問(wèn)好開(kāi)始。要做的太多，更需要的是持之以恒，有的在進(jìn)行著，有的在準(zhǔn)備當(dāng)中即將開(kāi)始。在這片美麗的土地上即以播下夢(mèng)想的種子，就一定會(huì)用心去灌溉。
大二個(gè)人學(xué)習(xí)計(jì)劃范文51、很快的大一過(guò)去了，大二學(xué)期已經(jīng)來(lái)了，從這個(gè)學(xué)期開(kāi)始我學(xué)習(xí)目標(biāo)要明確，實(shí)現(xiàn)目標(biāo)也有保證。
我要短時(shí)間內(nèi)達(dá)到一個(gè)小目標(biāo)。長(zhǎng)時(shí)間達(dá)到一個(gè)大目標(biāo)。在長(zhǎng)短計(jì)劃指導(dǎo)下，使學(xué)習(xí)一步步地由小目標(biāo)走向大目標(biāo)。
2、恰當(dāng)安排各項(xiàng)學(xué)習(xí)任務(wù)，使學(xué)習(xí)有秩序地進(jìn)行，有了計(jì)劃可以把自己的學(xué)習(xí)管理好。
到一定時(shí)候?qū)φ沼?jì)劃?rùn)z查總結(jié)一下自己的學(xué)習(xí)，看看有什么優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)，優(yōu)點(diǎn)發(fā)揚(yáng)，缺點(diǎn)克服，使學(xué)習(xí)不斷進(jìn)步，這個(gè)學(xué)期馬上就要考計(jì)算機(jī)證了，所以我們應(yīng)該多練習(xí)題目，英語(yǔ)也要考級(jí)，所以單詞也不能馬虎，要多記，上課聽(tīng)講，多做往年習(xí)題，提高自己各方面的成績(jī)。
3、對(duì)培養(yǎng)良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣大有幫助。
良好習(xí)慣養(yǎng)成以后，就能自然而然地按照一定的秩序去學(xué)習(xí)。有了計(jì)劃，也有利于鍛煉克服困難、不怕失敗的精神，無(wú)論碰到什么困難挫折也要堅(jiān)持完成計(jì)劃，達(dá)到規(guī)定的學(xué)習(xí)目標(biāo)。
4、提高計(jì)劃觀念和計(jì)劃能力，使自己成為能夠有條理地安排學(xué)習(xí)，生活、工作的人。
這種計(jì)劃觀念和計(jì)劃能力，學(xué)生都應(yīng)該學(xué)習(xí)和具備，這對(duì)一生都有好處。
5、分析自己的學(xué)習(xí)特點(diǎn)，同學(xué)們可以仔細(xì)回顧一下自己的學(xué)習(xí)情況，找出學(xué)習(xí)特點(diǎn)。
各人的學(xué)習(xí)特點(diǎn)不一樣：有的記憶力強(qiáng)，學(xué)過(guò)知識(shí)不易忘記;有的理解力好，老師說(shuō)一遍就能聽(tīng)懂;有的動(dòng)作快但經(jīng)常錯(cuò);有的動(dòng)作慢卻很仔細(xì)。如在數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)中有的理解力強(qiáng)、應(yīng)用題學(xué)習(xí)好;有的善于進(jìn)行口算，算得比較快，有的記憶力好，公式定義記得比較牢;有的想象力豐富，善于在圖形變換中找出規(guī)律。所以幾何學(xué)習(xí)比較好……
6、分析自己的學(xué)習(xí)現(xiàn)狀，一是和全班同學(xué)比，確定看自己在班級(jí)中成績(jī)的位置，還常用"好、較好、中、較差、差"來(lái)評(píng)價(jià)。
二是和自己數(shù)學(xué)成績(jī)的過(guò)去情況比，看它的發(fā)展趨勢(shì)，通常用"進(jìn)步大、有進(jìn)步、照常、有退步、退步大"來(lái)評(píng)價(jià)。
在新學(xué)期里學(xué)習(xí)要更加努力，獎(jiǎng)學(xué)金要拿，爭(zhēng)取拿一等。在專(zhuān)項(xiàng)訓(xùn)練自己突出能力、掌握一些基本的專(zhuān)業(yè)技能的同時(shí)，也在日常生活中應(yīng)該注意多余比別人交流，提高自己的處事和交際能力并樹(shù)立健康的贏取愛(ài)好，鍛煉好身體。這會(huì)對(duì)以后的工作和生活很重要。
積極配合老師的教學(xué)，緊跟老師的教學(xué)進(jìn)度，遇到問(wèn)題要多與同學(xué)或老師交流，盡快解決。端正自己的學(xué)習(xí)態(tài)度，認(rèn)真按質(zhì)按量完成老師交待的任務(wù)，不敷衍了事。注意加強(qiáng)自己的薄弱科目的學(xué)習(xí)，不偏科。 除了學(xué)習(xí)還應(yīng)該注意，加強(qiáng)自我身體鍛煉，
健康的勝利是學(xué)習(xí)效率的有理保證。 定期檢查自己的計(jì)劃的實(shí)行情況，以監(jiān)督保證計(jì)劃的正常實(shí)施。
大學(xué)第二年學(xué)習(xí)計(jì)劃制定一
大學(xué)生活過(guò)去一半，過(guò)了大一的懵懂與青澀，也過(guò)了大二的張揚(yáng)與躁動(dòng)。似乎接下來(lái)的大學(xué)生活只能這樣按部就班的過(guò)下去，開(kāi)學(xué)前期的漫無(wú)目的，以及考試前的死命突擊。其實(shí)，為了有一個(gè)美好的大學(xué)生活，以及將來(lái)走的更穩(wěn)更高，大三大四可以有一個(gè)很大的作為。抓住每一天，認(rèn)真學(xué)習(xí)認(rèn)真生活，韜光養(yǎng)晦。
總結(jié)起大二的生活，可以從以下幾個(gè)方面來(lái)說(shuō)。
第一，作息時(shí)間沒(méi)有大一規(guī)律?？赡苁侨说亩栊运?，或者自己沒(méi)有自制力。在好多個(gè)周末的早上總是一覺(jué)睡到大上午，白白浪費(fèi)了大好的時(shí)光。因?yàn)橥砩纤X(jué)都很晚，直接導(dǎo)致睡眠不足，早上起不來(lái)。形成了一種惡性循環(huán)。
第二，沒(méi)有好好堅(jiān)持鍛煉身體。晚自習(xí)的取消，待在宿舍，離操場(chǎng)遠(yuǎn)等等因素導(dǎo)致了自己沒(méi)能好好堅(jiān)持下來(lái)。
第三，沉溺玩手機(jī)。對(duì)手機(jī)的依賴(lài)性越來(lái)越大。其實(shí)，大多是玩些無(wú)聊的東西。白白的浪費(fèi)了自己的時(shí)間，還加重了自己的惰性，又形成了一種惡性循環(huán)。
第四，自制力不強(qiáng)。好多不健康的東西明知故犯，與自己與他人都是不好的。一定要杜絕，切勿貪一時(shí)之快。
第五，作為班級(jí)班長(zhǎng)，自己的領(lǐng)導(dǎo)能力，溝通能力以及化解矛盾的能力等等方面有待提高。
第六，守護(hù)好自己的愛(ài)情。要在這個(gè)過(guò)程中讓兩個(gè)人都學(xué)會(huì)愛(ài)。
提高自己。
為了更好地大學(xué)生活，特對(duì)以后的大學(xué)生活做一個(gè)或具體或粗略的規(guī)劃。
第一，一定要珍惜自己的時(shí)間。抓住一切時(shí)間來(lái)學(xué)習(xí)，不要在最能吃苦的年紀(jì)選擇了安逸。合理安排自己的作息時(shí)間，不要熬夜太多。保證每天有精力。
第二，每天不論多晚多累，一定要去跑步。跑20xx米，堅(jiān)持一個(gè)學(xué)期，保持好的身形為以后的競(jìng)爭(zhēng)作資本。一定要注意自己的外表打扮，不能拖沓。
第三，嚴(yán)格控制自己玩手機(jī)的時(shí)間與內(nèi)容。不在學(xué)習(xí)的時(shí)候玩手機(jī)，不看對(duì)自己成長(zhǎng)無(wú)益的內(nèi)容。
第四，作為班級(jí)班長(zhǎng)，要學(xué)會(huì)周旋，學(xué)會(huì)辦事，做任何事要有自己的判斷力，不能人云亦云，要學(xué)會(huì)自己考慮問(wèn)題與解決問(wèn)題。喜怒不形于色。做一個(gè)有能力的人。
第五，好好愛(ài)。一起成長(zhǎng)。
(學(xué)習(xí)篇)
總結(jié)起自己的學(xué)習(xí)狀態(tài)，最大的一點(diǎn)是自己有很大的畏難情緒。不能很好地堅(jiān)持下來(lái)，不能按捺浮躁的心情去做好手頭上的事。具體的來(lái)說(shuō)，有以下幾個(gè)方面的問(wèn)題。
1，不能靜下心來(lái)研究問(wèn)題，學(xué)習(xí)態(tài)度太浮夸。
2，上課不能好好聽(tīng)課，習(xí)慣于玩手機(jī)。 3，參加競(jìng)賽什么的態(tài)度沒(méi)掌握好。
規(guī)劃：
1，一定要對(duì)自己所學(xué)的專(zhuān)業(yè)有比自己身邊人有更加深入的研究。這樣才能脫穎而出，所以，平時(shí)一定要多鉆研。
總之，一定要好好的規(guī)劃，好好把握剩下來(lái)的兩年。
大學(xué)第二年學(xué)習(xí)計(jì)劃制定二
在人的一生當(dāng)中，4年的時(shí)間不能說(shuō)很長(zhǎng)，但對(duì)于一個(gè)青年大學(xué)生來(lái)說(shuō)，這寶貴的4年卻是匆忙而短暫的，因?yàn)榍啻嚎少F，大學(xué)是接下來(lái)人生發(fā)展的基礎(chǔ)，所以，珍惜大學(xué)4年的生活，好好奮斗，意義非凡。
大學(xué)第一年學(xué)習(xí)生活已經(jīng)過(guò)去了，總結(jié)過(guò)去，既有欣慰，也有遺憾，欣慰的我用一年的時(shí)間換來(lái)了自身的成長(zhǎng)，大一的我積極樂(lè)觀，學(xué)習(xí)上認(rèn)真，努力，工作上踏踏實(shí)實(shí)，不斷的向別人學(xué)習(xí)。付出總有收獲，我用自身的經(jīng)歷驗(yàn)證了這句話。
大一生活當(dāng)然也有遺憾，在成績(jī)上我并沒(méi)有取得我想象中的結(jié)果，沒(méi)有做到成為佼佼者。但不管怎樣，我還會(huì)繼續(xù)奮斗，像當(dāng)初那樣。進(jìn)入大二，我會(huì)把英語(yǔ)放在重中之重的位置，英語(yǔ)基礎(chǔ)本來(lái)就薄弱的我想要在大二有所突破，想要攻破四級(jí)必須比別人付出更多，我要把每一天的清晨、每一天的自習(xí)時(shí)間充分利用起來(lái)，避開(kāi)閑人的冷嘲熱諷，因?yàn)槲揖褪俏?，我走我的路，我有我的目?biāo)，我的理想，為理想而奮斗沒(méi)有錯(cuò)。另外，我要對(duì)我的學(xué)習(xí)方法進(jìn)行改進(jìn)，我想科學(xué)的學(xué)習(xí)方法能更快突破成績(jī)，科學(xué)的學(xué)習(xí)方法能夠事半功倍。
我的目標(biāo)很明確——通過(guò)12月份的全國(guó)英語(yǔ)四級(jí)考試，不管有多少困難，我都不會(huì)放棄。學(xué)生工作也是我大二學(xué)習(xí)生活的一個(gè)重點(diǎn)，在很多人眼中，學(xué)習(xí)部在學(xué)生會(huì)所有部門(mén)中是最重要的，具有代表性，對(duì)我來(lái)說(shuō)不僅是自豪，也是一份壓力，但我對(duì)自己有信心，我相信學(xué)習(xí)部在接下來(lái)的一年會(huì)做的更好，加油! 計(jì)劃是計(jì)劃，實(shí)踐是實(shí)踐，讓實(shí)踐踏著計(jì)劃的步伐走!
大學(xué)第二年學(xué)習(xí)計(jì)劃制定三
大學(xué)生活一年過(guò)去了，發(fā)現(xiàn)大學(xué)學(xué)習(xí)生活與中學(xué)很不同，要逐漸學(xué)會(huì)轉(zhuǎn)型，適應(yīng)大學(xué)的學(xué)習(xí)生活。中學(xué)教師作用非常大，學(xué)生跟著學(xué)，大學(xué)則通常每天二科目時(shí)間，課后有很多的學(xué)習(xí)過(guò)程是發(fā)生在課堂之外由學(xué)習(xí)者自主去完成的，大學(xué)的教學(xué)具有很強(qiáng)的獨(dú)立性和開(kāi)放性，所以獨(dú)立學(xué)習(xí)、學(xué)會(huì)學(xué)習(xí)的習(xí)慣養(yǎng)成在大學(xué)非常的重要。
上一學(xué)年由于學(xué)習(xí)任務(wù)沒(méi)有規(guī)劃好，學(xué)習(xí)目的不太明確等原因，導(dǎo)致了自己在學(xué)習(xí)過(guò)程中遇到了很多的`問(wèn)題，從而大大降低了學(xué)習(xí)的效率。針對(duì)上一學(xué)年自己在學(xué)習(xí)上存在的許多需要改進(jìn)地方，也結(jié)合自己本學(xué)期的課程特點(diǎn)，和學(xué)習(xí)任務(wù)的安排，為了更好的提高學(xué)習(xí)效率，充分利用有限的學(xué)習(xí)時(shí)間，取得更大的進(jìn)步，現(xiàn)制定出大二第一學(xué)期學(xué)習(xí)計(jì)劃，具體如下。
在新學(xué)期里學(xué)習(xí)要更加努力，獎(jiǎng)學(xué)金要拿，爭(zhēng)取拿一等。在專(zhuān)項(xiàng)訓(xùn)練自己突出能力、掌握一些基本的專(zhuān)業(yè)技能的同時(shí)，也在日常生活中應(yīng)該注意多余比別人交流，提高自己的處事和交際能力并樹(shù)立健康的贏取愛(ài)好，鍛煉好身體。這會(huì)對(duì)以后的工作和生活很重要。
積極配合老師的教學(xué)，緊跟老師的教學(xué)進(jìn)度，遇到問(wèn)題要多與同學(xué)或老師交流，盡快解決。端正自己的學(xué)習(xí)態(tài)度，認(rèn)真按質(zhì)按量完成老師交待的任務(wù)，不敷衍了事。注意加強(qiáng)自己的薄弱科目的學(xué)習(xí)，不偏科。 除了學(xué)習(xí)還應(yīng)該注意，加強(qiáng)自我身體鍛煉，
健康的勝利是學(xué)習(xí)效率的有理保證。 定期檢查自己的計(jì)劃的實(shí)行情況，以監(jiān)督保證計(jì)劃的正常實(shí)施。
這學(xué)期，我將在專(zhuān)業(yè)上更加強(qiáng)學(xué)習(xí)，專(zhuān)業(yè)知識(shí)顯的更為重要，要為了自己的未來(lái)著想，多去學(xué)校圖書(shū)館看些書(shū)，以更好的充電，填補(bǔ)自己各方面的知識(shí)空缺，增加知識(shí)面，增加個(gè)人修養(yǎng)。
那么，究竟要怎樣做，才能有效達(dá)到上列標(biāo)準(zhǔn)呢?這實(shí)在是「老生常談而且「見(jiàn)仁見(jiàn)智的問(wèn)題。不過(guò)，為了拋磚引玉，乃不揣簡(jiǎn)陋，就管見(jiàn)所及提出下列十項(xiàng)建議，敬請(qǐng)專(zhuān)家惠予指正。
第一， 袪除學(xué)習(xí)英語(yǔ)的心理障礙。最常見(jiàn)的障礙有兩種，一是決心不強(qiáng)，二是信心不夠。其實(shí)，要想學(xué)好英文或其他任何學(xué)科，非得先下定決心學(xué)好它不可。有人學(xué)英文已有七、八年甚至十幾年的歷史，卻仍未「學(xué)好，固然可以歸咎許多因素，但最根本的原因之一恐怕是沒(méi)有下定堅(jiān)強(qiáng)的「學(xué)好英文的決心。由于這個(gè)緣故，學(xué)習(xí)態(tài)度往往就顯得相當(dāng)被動(dòng)或消極。我曾教過(guò)「大一英文課，常?？吹讲簧賹W(xué)生修英文似乎只為了應(yīng)付考試，賺幾個(gè)學(xué)分而已。這些學(xué)生只喜歡念考試范圍以?xún)?nèi)的東西，范圍以外則沒(méi)有多大興趣。如有這種學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)與態(tài)度，卻想「學(xué)好英文，恐怕花再長(zhǎng)的時(shí)間也很難如愿以?xún)敗?/p>
收稿日期：2011-10-26
作者簡(jiǎn)介：曹偉（1981―），男,湖北荊州人,工程師,主要從事園林景觀規(guī)劃設(shè)計(jì)方面的工作。
中圖分類(lèi)號(hào)：TU986.1
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
文章編號(hào)：1674-9944(2011)11-0037-03
1引言
當(dāng)前,中國(guó)大學(xué)校園的新校區(qū)景觀建設(shè)方興未艾。各地新校園一般都規(guī)模龐大,建設(shè)速度驚人,在幾年內(nèi)就投入使用。但其建成使用后的實(shí)際情況并不理想,甚至有些與原有設(shè)想相距甚遠(yuǎn)。因此如何解決校園高速建設(shè)和資金投入緊張等因素同景觀設(shè)計(jì)所要求效果之間的矛盾,把握其中可變與永續(xù)的要素,探討大學(xué)校園景觀其自身的有機(jī)生長(zhǎng)和建設(shè)發(fā)展的規(guī)律,就成了亟待解決的問(wèn)題。筆者以江南大學(xué)新校區(qū)的二次景觀規(guī)劃為例。
江南大學(xué)新校區(qū)坐落于太湖之濱的江南名城――江蘇省無(wú)錫市,地處蠡湖大道以西、高浪路以南、震澤路以北、緣溪路以東地塊。新校區(qū)規(guī)劃總用地約230hm2,目前已基本建成占地208.3hm2、建筑面積95萬(wàn)m2的新校園。
2當(dāng)前校園總體規(guī)劃分析
校園從規(guī)劃建設(shè)伊始至今,時(shí)間跨度很大,其中北區(qū)主體景觀最先建成完工,其它景觀建設(shè)則按部就班進(jìn)行。在整個(gè)營(yíng)建過(guò)程之中,基本確立了具有明顯江南水鄉(xiāng)秀美風(fēng)光的氣質(zhì)和高品位的學(xué)術(shù)文化內(nèi)涵,生態(tài)優(yōu)勢(shì)明顯,但局部地方因多方面的原因略有遺憾。
2.1現(xiàn)狀優(yōu)勢(shì)分析
主要景觀軸線明確,導(dǎo)向性較強(qiáng),功能布局合理,形成了具有濃郁地域特色和獨(dú)特校園風(fēng)景的水鄉(xiāng)小鎮(zhèn)街道景觀體系;開(kāi)創(chuàng)了現(xiàn)代精神意義的曲水流觴景觀,融古于今,既提升了學(xué)校自身的文化品位又強(qiáng)化了學(xué)校濃厚的學(xué)術(shù)氛圍;初步構(gòu)成了校園綠色生態(tài)網(wǎng)絡(luò),給師生提供了大量戶(hù)外學(xué)習(xí)、交流、觀賞、游憩的景觀空間。
2.2現(xiàn)狀劣勢(shì)分析
(1)由于建設(shè)周期的緣故,采取了分期分批設(shè)計(jì)、施工的模式,致使校園景觀的完整性欠缺,逐漸偏離當(dāng)初的景觀總體規(guī)劃目標(biāo)。如景觀材料、植物品種選擇、空間的節(jié)奏變化和豐富性等缺乏一貫的有機(jī)聯(lián)系。
(2)校園景觀空間與太湖風(fēng)景區(qū)、長(zhǎng)廣溪綠化帶、西山的相互咬合、滲透、有機(jī)融合性還很弱,透景線廊道的處理也有待深化、提煉。如校園整體地勢(shì)較為平坦,局部豎向地形沒(méi)有和西山山體形成互動(dòng),未更有效達(dá)到借西山之景來(lái)形成山環(huán)水繞的山水格局。
(3)現(xiàn)有部分景觀過(guò)分注重面的表現(xiàn)(主要指臨時(shí)綠化),采用遮擋的方式,較為封閉,阻礙了人的視覺(jué)可達(dá)性,造成景觀的層次和深度缺乏,使人在視覺(jué)上審美疲勞。
(4)校園水系的常水位的穩(wěn)定性問(wèn)題。常水位標(biāo)高和設(shè)計(jì)之初有變化,致使部分親水平臺(tái)、樹(shù)木遭水淹沒(méi)。校園中植物品種重復(fù)性過(guò)高,品種豐富度偏弱;整體植物的數(shù)量偏少、規(guī)格偏小,局部重要景觀節(jié)點(diǎn)缺乏相應(yīng)的高大喬木和優(yōu)美造景樹(shù)的支撐和點(diǎn)綴。
3二次景觀規(guī)劃構(gòu)思
從校園建設(shè)規(guī)劃伊始所倡導(dǎo)的“指狀布局規(guī)劃模式”入手，對(duì)校園的景觀結(jié)構(gòu)加以重新梳理、整合、并使之明確定性，然后在結(jié)構(gòu)和總體景觀思想的指引之下，整體實(shí)施方案和施工圖設(shè)計(jì)（含景觀修建、補(bǔ)建、新建項(xiàng)目），力爭(zhēng)一步到位，避免景觀盲區(qū)的產(chǎn)生，最終達(dá)到終極目標(biāo)――創(chuàng)造一個(gè)人文與生態(tài)交融共生，傳統(tǒng)與現(xiàn)代互為滲透，充滿(mǎn)情感的校園景觀。
3.1設(shè)計(jì)原則和重點(diǎn)
3.1.1交往觀
以“交往”作為校園景觀的本質(zhì)意義,進(jìn)一步營(yíng)造具有歸屬感的生活學(xué)習(xí)環(huán)境,從而創(chuàng)造富有活力的不同氛圍的特色交往空間。另外,也相當(dāng)注重綠地的高參與性和開(kāi)放性,達(dá)成人與自然的交流,人與歷史文化的交流。
3.1.2尺度觀
確保各類(lèi)空間的尺度和諧統(tǒng)一,互為滲透,營(yíng)造宜人情境場(chǎng)所。
3.1.3文化觀
景觀設(shè)計(jì)中韻含恬淡深遠(yuǎn)的人文色彩環(huán)境特征,體現(xiàn)江南文化的博大精深和兼容并蓄的特質(zhì);同時(shí)體現(xiàn)學(xué)校深厚的歷史文化傳統(tǒng)即校史文化以及具有本校特色的新校園文化。
3.1.4生態(tài)觀
以生態(tài)、可持續(xù)發(fā)展為第一訴求,營(yíng)造日久彌新的生態(tài)校園。因地制宜地配置植物群落,多采用節(jié)水性植物,形成可持續(xù)生長(zhǎng)的生態(tài)環(huán)境特征。同時(shí),充分利用校園水系和外界聯(lián)通的有利條件,通過(guò)水生動(dòng)植物的養(yǎng)育及多樣性駁岸等的綜合設(shè)計(jì)來(lái)提高校園水系的自然生態(tài),進(jìn)一步構(gòu)建和諧的親水環(huán)境。
3.2空間布局和特色
整個(gè)校園二次景觀規(guī)劃布局(見(jiàn)圖1)由 “一心、兩軸、三帶、四點(diǎn)、五路、六園、七院、一環(huán)”的空間脈絡(luò)結(jié)構(gòu)組成,它既具有點(diǎn)、線、面有機(jī)組合的空間形式,也蘊(yùn)含多層次、多內(nèi)涵的風(fēng)景韻味。
圖1校園景觀規(guī)劃布局
3.2.1一心:中心湖區(qū)
小蠡湖地處全校的中心,四周環(huán)繞各院系教學(xué)樓、圖書(shū)館等高校重要建筑物,集全校的教育文化、人文精神傳承、信息交流和生態(tài)風(fēng)景共享等中心于一體。
3.2.2兩軸
(1)東西軸。從東大門(mén)到行政樓再到圖書(shū)館,是學(xué)校及其重要的禮儀文化景觀軸線,是學(xué)校對(duì)外宣傳、展示的形象窗口。
(2)南北軸。由北校門(mén)到南校門(mén),縱貫整個(gè)校園南北,串聯(lián)了學(xué)生宿舍區(qū)、教工生活區(qū)、體育運(yùn)動(dòng)區(qū)、教學(xué)區(qū)、圖書(shū)館等空間,是學(xué)校的南北大動(dòng)脈。它是最能反映校園文化肌理、地域風(fēng)情的一條曲水流觴濱水步行景觀軸。
3.2.3三帶
(1)生活水街景觀帶。橫貫校園北區(qū)的學(xué)生宿舍、食堂、商店、書(shū)店等生活化建筑群,是校園中人氣最旺、最能體現(xiàn)大學(xué)生日常生活情景的風(fēng)景帶。通過(guò)對(duì)“小橋、埠頭、花廊、長(zhǎng)亭、山石”等質(zhì)樸景觀元素的再提煉,呈現(xiàn)一幅充滿(mǎn)活力的江南水鄉(xiāng)小鎮(zhèn)的生活畫(huà)卷。
(2)休閑親水步行景觀帶。北承小蠡湖之煙波,南通護(hù)校河之寬廣,是校園南區(qū)的主要河流,沿河分布著西區(qū)教學(xué)科研樓、學(xué)生宿舍、食堂、活動(dòng)中心等校園建筑群,人流量很大。該景觀帶是人們?nèi)粘Ｐ蓍e放松、戶(hù)外自修、游覽觀光的生態(tài)步行親水活動(dòng)場(chǎng)所。
(3)幽幽水巷景觀帶。西接雪浪潭東連護(hù)校河,構(gòu)建南區(qū)一條重要的東西向水系風(fēng)光帶。
3.2.4四點(diǎn)
(1)東入口廣場(chǎng)。作為校園的主入口,景觀追尋一種雍容大氣、開(kāi)放自由的氣質(zhì),不作太多的繁復(fù)修飾,以大樹(shù)、草坪、山石、鮮花為主要構(gòu)景元素,簡(jiǎn)練深遠(yuǎn)。
(2)北入口廣場(chǎng)。作為校園目前和外界聯(lián)系最為緊密的入口空間,景觀追尋的是一種帶有地域文化烙印的風(fēng)貌,具有江南學(xué)府博大精深的魅力。
(3)小蠡湖之影波臺(tái)。作為圖書(shū)館的和小蠡湖以及南北軸線的交匯點(diǎn),繼續(xù)強(qiáng)化其作為校園的最佳觀景平臺(tái)的作用。
(4)雪浪潭之桃花塢。作為曲水河、東行河和新紅河的交匯大水面,構(gòu)建一處具有相當(dāng)景觀特色和詩(shī)情畫(huà)意的濱水空間,成為進(jìn)入南入口之后的重要景觀節(jié)點(diǎn)。
3.2.5五路
五路分別是中央大道、三江路、兩江路、泰山路、峨眉山路,呈“中”字型分布,形成校園的主要交通綠色廊道。
3.2.6六園
六園由校友名人園、森林拓展園、西塘濕地園、遺址展示園、人文藝術(shù)園、風(fēng)雅傳道園組成。它們是具有明顯的景觀、教化、參與意義的特色風(fēng)景園,是江南大學(xué)所獨(dú)有的綠色寶庫(kù)。
3.2.7七院
七院即教學(xué)東區(qū)組團(tuán)、教學(xué)西區(qū)組團(tuán)、北區(qū)學(xué)生庭院組團(tuán)、南區(qū)學(xué)生庭院組團(tuán)、教工庭院組團(tuán)、體育公園區(qū)組團(tuán)和工業(yè)遺產(chǎn)區(qū)組團(tuán)。它們多為內(nèi)向型景觀庭院,是校園師生生活學(xué)習(xí)的場(chǎng)所。
3.2.8一環(huán)
一環(huán)指的是護(hù)校河與城市界面的景觀環(huán),是城市和校園過(guò)渡的綠色虛空間。
3.3實(shí)施措施和重點(diǎn)
在上述規(guī)劃布局的指引下,統(tǒng)籌兼顧,按照景觀的重要性和迫切性把校園建設(shè)的先后劃分為A、B、C 3個(gè)層次。
(1)A級(jí)為“一心、兩軸、四點(diǎn)”,其關(guān)系到學(xué)校的總體景觀風(fēng)貌和學(xué)術(shù)文化內(nèi)涵的建立,是和外界交流的主要形象通道,因此景觀實(shí)施必須優(yōu)先考慮。
(2)B級(jí)為“三帶、六園”,其作為江南大學(xué)獨(dú)有的風(fēng)景,是具有相當(dāng)景觀魅力和校園文化品位的,它的建立,會(huì)讓江大迅速躋身世界優(yōu)美高校的行列。
(3)C級(jí)為“一環(huán)、五路、七院”,在構(gòu)建完整的生態(tài)景觀體系之下,其主要作為校園的發(fā)展類(lèi)景觀,和校園一起慢慢成長(zhǎng)。“十年樹(shù)木,百年樹(shù)人”,它將見(jiàn)證江大的發(fā)展歷程。
2011年11月綠色科技第11期
4結(jié)語(yǔ)
大學(xué)校園景觀設(shè)計(jì),復(fù)雜過(guò)任何一幢單體教學(xué)樓的設(shè)計(jì),是一項(xiàng)系統(tǒng)工程,而不僅僅只是停留在藍(lán)圖上的美好景象,應(yīng)當(dāng)作為學(xué)校建設(shè)的重點(diǎn)內(nèi)容,確保設(shè)計(jì)、施工和養(yǎng)護(hù)管理三者并重,缺一不可,要用有機(jī)生長(zhǎng)的觀點(diǎn)對(duì)待這項(xiàng)宏偉工程,并在實(shí)際過(guò)程中抓住每一個(gè)細(xì)部環(huán)節(jié),只有這樣才能實(shí)現(xiàn)最終的理想目標(biāo)。
參考文獻(xiàn)：
【關(guān)鍵詞】 二烯丙基二硫化物
Effect of Diallyl Disulfide on Expression and Secretion of VEGF in HL-60 Leukemic Cells
Abstract
The study was aimed to investigate the expression of VEGF mRNA and VEGF protein in HL-60 cells treated with diallyl disulfide (DADS)，and to explore the antileukemic mechanism of DADS in respect of VEGF production.Semi-quantitative RT-PCR and ELISA were used to detect the expression of VEGF mRNA and secretion of VEGF protein in HL-60 cell lines treated by DADS respectively. The results showed that the expression of VEGF mRNA and secretion of VEGF protein were found in HL-60 cells.The expression of VEGF mRNA and secretion of VEGF protein in HL-60 cells could be down regulated by treatment with 0.625，1.25，and 2.5 μg/mL DADS for 48 and 72 hours and the effects had a dose dependent relationship（r>0.9，P
Key words
diallyl disulfide; HL-60 cell; leukemia; vascular endothelial growth factor
全反式維甲酸（ATRA）已成為治療急性早幼粒白血病的首選藥物，但也有其局限性，并且還會(huì)發(fā)生維甲酸綜合征不良反應(yīng)，因此尋找毒副作用低的抗白血病的藥物仍是當(dāng)前研究的重要課題。已有研究證明，大蒜中的一種脂溶性的有效成分二烯丙基二硫化物（diallyl disulfide，DADS）對(duì)乳腺癌、皮膚癌、肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、結(jié)腸癌和白血病等細(xì)胞均有抑制作用［1-3］，但其作用機(jī)制尚未明了。本研究初步探討DADS對(duì)HL-60白血病細(xì)胞株抑制作用的可能機(jī)制。
材料和方法
細(xì)胞系及試劑
人急性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞系HL-60細(xì)胞，由中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院細(xì)胞中心提供。RPMI 1640培養(yǎng)液為美國(guó)Gibco公司產(chǎn)品。胎牛血清為杭州四季青生物工程公司產(chǎn)品。DADS為美國(guó)Fluka公司產(chǎn)品，相對(duì)分子質(zhì)量為146.28，純度為80% [含10%-20% 二烯丙基硫醚(DAS) ］ ；Tween 80為華美公司產(chǎn)品；全反式維甲酸為美國(guó)Sigma 公司產(chǎn)品，相對(duì)分子質(zhì)量為300.44，純度≥98 % 。TRIZOL購(gòu)自美國(guó)Gibco BRL公司；cDNA合成試劑盒、dNTP、 TaqDNA聚合酶均購(gòu)自晶美生物技術(shù)有限公司，為美國(guó)Fermentas公司產(chǎn)品；電泳用瓊脂糖為德國(guó)Promega公司產(chǎn)品；RULERTM DNA 100 bp ladder產(chǎn)品購(gòu)自晶美公司；VEGF ELISA試劑盒購(gòu)自晶美生物公司。VEGF引物由上海博亞生物工程服務(wù)有限公司合成，引物序列參見(jiàn)文獻(xiàn)[1 ］ 。VEGF(Genbank 登錄號(hào): NM-003376) 上游引物： 5′-TCGGGCCTCCGAAACCATGA-3′，下游引物： 5′-CCTGGTGAG-AGATCTGGTTC-3′，根據(jù)mRNA剪切位點(diǎn)的不同，擴(kuò)增產(chǎn)物為516、588、648 bp長(zhǎng)度片段。β-actin (Genbank 登錄號(hào): NM-001101)上游引物： 5′-ATCTGGCACCACACCTTCTACAATGAGCTGCG-3′，下游引物: 5′-CGTCATACTCCTGCTTGCTGATCCACAT-CTGC-3′，擴(kuò)增產(chǎn)物837 bp 。
細(xì)胞培養(yǎng)及細(xì)胞處理
將HL-60 細(xì)胞懸浮培養(yǎng)于含10 %胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液中，于37℃、5 % CO2、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，2-3天傳代1次。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞懸液終濃度為2×106/ml 。實(shí)驗(yàn)設(shè)為6組，1-3 組為不同濃度(0.625、1.25、2.5 μg/ ml) DADS組，4 組為試劑對(duì)照(RPMI 1640)對(duì)照組；5 組為溶媒Tween 80對(duì)照組；6 組為ATRA（濃度為1.5μg/ ml）陽(yáng)性對(duì)照組。每組2瓶。每50 ml培養(yǎng)瓶加入細(xì)胞數(shù)為5×106的細(xì)胞懸液、不同濃度的藥物、 RPMI 1640培養(yǎng)液，每瓶培養(yǎng)體積為5 ml，放置于37℃、 5% CO2、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48、72小時(shí)。收集各時(shí)相細(xì)胞上清液，保存于1.5 ml EP管中，-20 ℃保存。 各時(shí)相細(xì)胞5×106個(gè)裝入1.5 ml EP管中，-70℃保存，待抽提總RNA。
細(xì)胞培養(yǎng)上清液VEGF蛋白水平的測(cè)定
VEGF蛋白水平采用定量ELISA法測(cè)定。酶標(biāo)儀上讀取每孔的OD450值(5分鐘內(nèi))取復(fù)孔濃度的平均值。
細(xì)胞VEGF mRNA表達(dá)的RT-PCR檢測(cè)
細(xì)胞總RNA提取
按TRIZOL一步法提取細(xì)胞總RNA。電泳鑒定RNA的質(zhì)量，紫外分光光度儀定量。
逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)
取上述制備的RNA樣品1 μl進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，20 μl逆轉(zhuǎn)錄體系包括：總RNA樣品1 μl，Oligo(dT)18 0.5 μg/μl×1 μl，用DEPC水補(bǔ)至體積12 μl 后，70 ℃變性5分鐘，冰上驟冷，加入5×Rt緩沖液4 μl，dNTP 10 mmol/L×2 μl，RiboLockTM Ribonuclease inhibitor 20 U/μl×1 μl，37℃溫育5分鐘，加入RevertAidTMM-MuLV Reverse Transcriptase 200 U/μl×1 μl，42℃溫育60分鐘。結(jié)束反應(yīng)后，70℃變性10分鐘，冰上驟冷10分鐘，用于擴(kuò)增或-20℃保存。
逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)物擴(kuò)增
取上述逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)產(chǎn)物2.0 μl，于20 μl反應(yīng)體系中行PCR擴(kuò)增。 反應(yīng)體系(20 μl)包括：10 ×PCR 緩沖液2.0 μl，25 mmol/L MgCl2 1.6 μl，10 mmol/L dNTP 0.4 μl，5 U/μl Taq DNA 聚合酶0.4 μl，VEGF上游及下游引物各0.2 μl或β-actin上游及下游引物各0.2 μl，逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物cDNA 2.0 μl，滅菌雙蒸水補(bǔ)足20 μl 。瞬時(shí)離心，置于PCR 擴(kuò)增儀上，預(yù)變性95℃ 2分30秒后，94℃變性40秒，60℃退火40秒，72℃延伸40秒，共32個(gè)循環(huán)，最后72℃ 5分鐘結(jié)束反應(yīng)，4℃保存。
PCR擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳
15 g/L瓊脂糖凝膠加入終濃度為0.5 μg/ml的溴化乙錠，取上述PCR 擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物5 μl、溴酚藍(lán)上樣指示劑1 μl，加入到凝膠的點(diǎn)樣孔中，每次取6 μl電泳，在100 V電壓電泳約1小時(shí)。取出凝膠，在紫外反射透射凝膠圖像分析儀上觀察電泳結(jié)果并照相。通過(guò)掃描取復(fù)管電泳條帶灰度的平均值，根據(jù)VEGF 與β-actin灰度比值，進(jìn)行目的基因表達(dá)的半定量分析。
統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
所有數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( ±SD)表示。采用SPSS 11.0計(jì)算機(jī)軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，兩樣本間比較用配對(duì)t檢驗(yàn)，多組樣本均數(shù)間比較用單因素方差分析，雙因素相關(guān)分析，兩兩之間多重比較：方差齊用LSD檢驗(yàn)、方差不齊用Dunnett T3檢驗(yàn)。P>0.05為差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P
結(jié)果
二烯丙基二硫化物對(duì)HL-60 細(xì)胞分泌VEGF蛋白的影響
結(jié)果如表1所示。3種濃度DADS及全反式維甲酸作用48 小時(shí)和72 小時(shí)后細(xì)胞上清液中VEGF濃度與空白對(duì)照比較，顯著減低(P＜0.01），表明0.625、1.25 和2.5 μg/ml的DADS及1.5 μg/ml全反式維甲酸作用HL-60細(xì)胞48小時(shí)和72小時(shí)可抑制HL-60 細(xì)胞分泌VEGF。3種DADS藥物濃度之間比較，差異具有顯著性(P＜0.01），干預(yù)同一時(shí)間點(diǎn)后DADS抑制HL-60細(xì)胞分泌VEGF的作用隨濃度的升高而增大（r絕對(duì)值均>0.9，P＜0.01），但Tween 80對(duì)HL-60 細(xì)胞分泌VEGF無(wú)影響（P＞0.05）。全反式維甲酸與3種藥物濃度之間比較差異顯著(P＜0.01）。Table 1.VEGF protein in HL-60 cell lines treated by DADS（略）
DADS對(duì)HL-60 細(xì)胞VEGF mRNA表達(dá)的影響
3種濃度的DADS作用于白血病HL-60細(xì)胞48小時(shí)、72小時(shí)后，細(xì)胞VEGF mRNA與內(nèi)參照β-action條帶灰度比值結(jié)果如表2所示。從表2中可以看出，0.625、1.25、2.5 μg/ml的DADS作用HL-60細(xì)胞48小時(shí)、72小時(shí)，VEGF灰度比值與對(duì)照組相比顯著降低(P﹤0.01)，即0.625、1.25、2.5 μg/ml的DADS處理HL-60細(xì)胞48小時(shí)和72小時(shí)，可明顯下調(diào)HL-60細(xì)胞VEGF mRNA的表達(dá)(P﹤0.01)。各藥物濃度組差異顯著(P﹤0.01)，VEGF mRNA相對(duì)表達(dá)量與DADS濃度負(fù)相關(guān)（r絕對(duì)值均>0.9，P＜0.01），即其下調(diào)HL-60細(xì)胞VEGF mRNA的表達(dá)隨濃度的升高而增大。作用HL-60細(xì)胞72小時(shí)全反式維甲酸與1.25 μg/ml的DADS下調(diào)HL-60細(xì)胞VEGF mRNA的表達(dá)作用相近(P＞0.05)。Table 2.Expression of VEGF mRNA in HL-60 cells treated with DADS (略)
PCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳部分結(jié)果
結(jié)果如圖1、2所示，HL-60細(xì)胞表達(dá)VEGF mRNA的3種片段，即516 bp、588 bp和648 bp，分別是3種異構(gòu)體VEGF121、VEGF145、VEGF165 mRNA的擴(kuò)增產(chǎn)物，HL-60細(xì)胞以VEGF121的表達(dá)最強(qiáng)。在同一時(shí)間點(diǎn)上隨作用藥物濃度的升高，VEGF條帶與β-actin條帶豐度比值下降。
討 論
VEGF可以刺激新生血管的產(chǎn)生，通過(guò)自分泌和旁分泌途徑促進(jìn)自身的增殖，VEGF可能作為一種旁分泌因子影響著白血病細(xì)胞自身的生物學(xué)效應(yīng)［4］。大量的臨床研究證明，VEGF在各類(lèi)型的白血病細(xì)胞中均有高表達(dá)，且是影響白血病發(fā)生發(fā)展及預(yù)后的獨(dú)立因素之一，尋找能抗VEGF產(chǎn)生的藥物在白血病的治療中就具有十分重要的意義。
DADS是大蒜中一種有效的脂溶性成份，具有抑制白血病細(xì)胞生長(zhǎng)、誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化、促進(jìn)白血病細(xì)胞凋亡作用。為進(jìn)一步探討DADS抑制白血病細(xì)胞增殖的機(jī)制，我們用ELISA法檢測(cè)了不同濃度DADS作用48小時(shí)、72小時(shí)后白血病細(xì)胞培養(yǎng)液中VEGF的含量，用RT-PCR法檢測(cè)VEGF mRNA相對(duì)量的變化，從而從蛋白及轉(zhuǎn)錄水平上探討DADS對(duì)白血病細(xì)胞分泌VEGF及VEGF mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果表明：經(jīng)DADS處理過(guò)的HL-60 細(xì)胞，其VEGF的表達(dá)及分泌被抑制（P＜0.01)，因而認(rèn)為其抑制白血病細(xì)胞生長(zhǎng)途徑之一可能是抑制人HL-60細(xì)胞VEGF基因的表達(dá)。我們的這一結(jié)果與2001年國(guó)內(nèi)學(xué)者高艷景等［5］的研究相似，他們用大蒜素（主要成分為二烯丙三硫占40 %以上，其次為DADS ［6］）處理人肝癌細(xì)胞株BEL7402 8小時(shí)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)大蒜素有明顯抑制人肝癌細(xì)胞VEGF mRNA表達(dá)的作用，與對(duì)照組相比，VEGF mRNA表達(dá)水平降低了約66.36 %(P
DADS抑制白血病細(xì)胞分泌VEGF的機(jī)制可能與DADS的誘導(dǎo)分化作用有關(guān)。DADS誘導(dǎo)白血病細(xì)胞分化，使白血病細(xì)胞部分轉(zhuǎn)變成正常單個(gè)核細(xì)胞，從而導(dǎo)致分泌血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的能力下降。在VEGF的調(diào)控中腫瘤抑制基因的失活或突變可導(dǎo)致VEGF 在腫瘤細(xì)胞中的過(guò)度表達(dá)，如VHL基因、p53基因的失活。而癌基因ras、raf或src 的突變或擴(kuò)增可啟動(dòng)VEGF 轉(zhuǎn)錄，使表達(dá)上調(diào)［8，9］。Ras 基因突變頻繁發(fā)生于許多癌癥中，這種突變可永久性地啟動(dòng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而引起腫瘤發(fā)生。在NIH313 細(xì)胞株與突變H-ras 基因轉(zhuǎn)染模擬體外致瘤實(shí)驗(yàn)中，口服DADS可呈劑量依賴(lài)性抑制NIH313細(xì)胞生長(zhǎng)，阻礙可測(cè)量腫瘤的形成。這種抑制作用與DADS抑制了腫瘤細(xì)胞膜相關(guān)P21 蛋白有關(guān)，從而抑制了Ras P21 蛋白活化，進(jìn)而抑制了ras基因的突變［10］。因此，我們認(rèn)為DADS能降低HL-60白血病細(xì)胞VEGF的分泌及表達(dá)可能與它抑制基因的突變有關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)中，我們分析DADS對(duì)HL-60細(xì)胞分泌VEGF的影響時(shí)，選擇的藥物濃度低于4 μg/ml。 Kwon 等［3］報(bào)道，DADS在約25 μmol/L (4 μg/ml) 時(shí)開(kāi)始誘導(dǎo)凋亡，即我們選擇的藥物濃度低于DADS誘導(dǎo)凋亡的濃度，結(jié)果提示DADS可抑制腫瘤細(xì)胞表達(dá)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子，因此我們認(rèn)為，DADS在低濃度時(shí)降低HL-60細(xì)胞VEGF的表達(dá)與其誘導(dǎo)凋亡的關(guān)系可能不大。DADS抑制VEGF的促血管新生可能是DADS抗腫瘤的又一種可能機(jī)制。
我們的實(shí)驗(yàn)表明，化學(xué)保護(hù)劑DADS可抑制白血病細(xì)胞VEGF的表達(dá)及分泌，從而可削弱VEGF對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的旁分泌作用，因而具有抗血管新生的活性。由于DADS無(wú)明顯的骨髓抑制作用，但具有抗血管新生的活性，故推測(cè)其與放療、化療相結(jié)合，將會(huì)增強(qiáng)放療、化療的療效，減少后者的用量，降低毒性，有助于白血病的治療。但是我們的研究?jī)H限于體外腫瘤細(xì)胞系的實(shí)驗(yàn)，整體動(dòng)物體內(nèi)及人體內(nèi)的治療效果尚有待進(jìn)一步驗(yàn)證。另外，DADS下調(diào)白血病細(xì)胞VEGF分泌及表達(dá)的機(jī)制尚未明確，需進(jìn)一步研究闡明。
【參考文獻(xiàn)】
1Gupta N，Porter TD.Garlic and garlic-derived compounds inhibit human squalene monooxygenase.J Nutr，2001; 131：1662-1667
2Robert V，Mouille B，Mayeur C，et al.Effects of the garlic compound diallyl disulfide on the metabolism，adherence and cell cycle of HT-29 colon carcinoma cells:evidence of sensitive and resistant sub-po-pulations.Carcinogenesis，2001;22:1155-1161
3Kwon KB，Yoo SJ，Ryu DG，et al.Induction of apoptosis by diallyl disulfide through activation of caspase-3 in human leukemia HL-60 cell.Biochem Pharmacol，2002; 63:41-47
4 Fiedler W，Graeven U，Ergün S，et al. Vascular endothelial growth factor，a possible paracrine growth factor in human acute myeloid leukemia.Blood，1997; 89:1870-1875
5 高艷景，袁孟彪，辛華等. 大蒜素抑制人肝癌細(xì)胞中VEGF mRNA 表達(dá)的研究. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2001; 17:531-533
6 朗彝江，張光遠(yuǎn). 大蒜有效成分的研究. 中草藥，1981; 12: 4-6
7 Shukla Y，Arora A，Singh A.Antitumorigenic potential of diallyl sulfide in Ehrlich ascites tumor bearing mice.Biomed Environ Sci，2002; 15:41-47
兒童急性B淋巴細(xì)胞白血?。˙-ALL）在兒童白血病中發(fā)病率較高，B-ALL在兒童急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL)中占80%～85%［1］，臨床預(yù)后比其他急性白血病較好。但在B-ALL中有一種變異高表達(dá)CD13的急性白血病，我們稱(chēng)之為B淋巴細(xì)胞白血病變異表達(dá)CD13，這種疾病臨床預(yù)后較差，化療時(shí)副作用大，并發(fā)癥嚴(yán)重，因此，采取合適的護(hù)理對(duì)策，不但可減輕患兒的痛苦，還能達(dá)到滿(mǎn)意的化療效果。近年來(lái)我科共收治13例兒童急性B淋巴細(xì)胞白血病變異表達(dá)CD13的患兒，現(xiàn)將護(hù)理體會(huì)報(bào)道如下。
1 臨床資料
選擇2007年5月~2012年5月我院收治的13例患兒，其中男8例，女5例。年齡1~5歲4例，6~12歲9例。均通過(guò)骨髓穿刺確診為兒童急性B淋巴細(xì)胞白血病變異表達(dá)CD13。其主要診斷依據(jù)為符合急性B淋巴細(xì)胞白血病免疫表型且具有典型異常高表達(dá)髓系標(biāo)志CD13的特點(diǎn)，在流式細(xì)胞技術(shù)檢驗(yàn)中主要表達(dá)的抗體有CD19,CD34,CD38,HLA-DR,CD20,CD22,TdT及CD13，其形態(tài)學(xué)特點(diǎn)有細(xì)胞胞體大小不等，染色質(zhì)疏松，核仁明顯1~2個(gè)，胞質(zhì)多數(shù)不整齊，邊緣易見(jiàn)突出，部分漿中有可疑細(xì)小顆粒。本組13例患兒中對(duì)初治的4例采用環(huán)磷酰胺+長(zhǎng)春新堿+柔紅霉素+潑尼松+左旋門(mén)冬酰胺酶（CODPL）方案，雖然并發(fā)癥較少但臨床緩解率較低，預(yù)后較差，化療效果不滿(mǎn)意；后治的9例患兒改用CODPL加小劑量阿糖胞苷治療，臨床緩解率比采用CODPL方案較高，但缺點(diǎn)是化療周期長(zhǎng)，化療副作用大，并發(fā)癥嚴(yán)重，其中并發(fā)支氣管肺炎4例，重度感染2例，消化道出血1例，口腔潰瘍1例，化療藥?kù)o脈炎1例。
2 護(hù) 理
2.1 心理疏導(dǎo)及干預(yù) 白血病的治療是一個(gè)很長(zhǎng)的過(guò)程，目前國(guó)內(nèi)治療的療程要求達(dá)到5年。在這漫長(zhǎng)的過(guò)程中，有效穩(wěn)定患兒及家長(zhǎng)的情緒,使其自覺(jué)接受治療是保證醫(yī)療效果的關(guān)鍵，還可起到藥物所不能達(dá)到的作用。對(duì)于6歲左右的幼小患兒，因本身的知識(shí)所限，其負(fù)性情緒如焦慮等反應(yīng)就較少，這類(lèi)患兒要盡量讓家長(zhǎng)陪伴,提供有趣的書(shū)籍和玩具等,分散其對(duì)穿刺所致的疼痛、化療所致各種反應(yīng)的注意力，還應(yīng)更多地關(guān)注家長(zhǎng)的心理變化并進(jìn)行心理指導(dǎo)［2］，因?yàn)榧议L(zhǎng)的情緒變化與患兒的心理和治療效果呈直接關(guān)系，要讓家長(zhǎng)樹(shù)立信心，積極配和治療，并告之化療是治療白血病的重要手段，讓家長(zhǎng)了解所用的化療藥物、劑量、副作用及可能出現(xiàn)的不良反應(yīng)（如合并感染、出血、 血尿、脫發(fā)等），并講解定期化驗(yàn)（血象，骨髓、肝、腎功能，腦脊液等）的必要性，以及患兒所處的治療階段。對(duì)于11歲左右的患兒，雖然對(duì)白血病的危害性還未感到恐懼,但卻很容易受住院治療、化療藥物所致胃腸道反應(yīng)及脫發(fā)后自我形象改變等因素的影響，所以我們要告訴患兒及其家長(zhǎng),脫發(fā)只是暫時(shí)現(xiàn)象,待化療結(jié)束后,頭發(fā)會(huì)慢慢長(zhǎng)出來(lái)［3］。我們通過(guò)以上一系列的心理護(hù)理措施，13例患兒全部積極接受治療，保證了治療方案的有效進(jìn)行。
2.2 感染的觀察與護(hù)理 急性白血病患兒本來(lái)自身抵抗力低,再加上使用化療藥物,白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞數(shù)就會(huì)明顯降低,當(dāng)粒細(xì)胞<0.5×109/L時(shí)，感染的發(fā)生率增高，而粒細(xì)胞<0.1×109/L時(shí)，敗血癥及其他嚴(yán)重感染更易出現(xiàn)。本組患兒中有8例存在不同程度的發(fā)熱,4例支氣管肺炎,2例重度感染,1例口腔潰瘍,以上感染的患兒除應(yīng)用廣譜抗生素外,重度感染的患兒還加用了萬(wàn)古霉素聯(lián)合治療，萬(wàn)古霉素雖抗菌力強(qiáng)但毒副作用也大，使用時(shí)注意嚴(yán)格控制滴速在1 h以上，嚴(yán)密觀察有無(wú)血尿等腎毒性表現(xiàn)，定期監(jiān)測(cè)聽(tīng)力，發(fā)現(xiàn)耳鳴、眩暈等癥狀及時(shí)處理。護(hù)理時(shí)要嚴(yán)格執(zhí)行消毒隔離制度,保證護(hù)理人員的手衛(wèi)生，病室空氣流通,地面及床頭桌椅均用84消毒液擦拭,做好保護(hù)性隔離。對(duì)于高熱患兒要進(jìn)行體溫監(jiān)測(cè)，給予適當(dāng)?shù)慕禍靥幚恚囡嬎?保證水分的攝入。對(duì)于合并支氣管肺炎患兒可霧化吸入生理鹽水+鹽酸氨溴索，進(jìn)行消炎、鎮(zhèn)咳、祛痰等對(duì)癥治療。對(duì)于發(fā)生口腔潰瘍的患兒我們用生理鹽水棉球做口腔護(hù)理，每天2～3次，在潰瘍面涂冰硼散，每天3～4次，漱口液可選用碳酸氫鈉與呋喃西林漱口液交替漱口，如疼痛嚴(yán)重，可用1%普魯卡因2 ml+慶大霉素8萬(wàn)U+地塞米松2 mg+生理鹽水100 ml溶液含漱，以減輕疼痛［4］。皮膚護(hù)理時(shí)要注意大小便后及時(shí)清潔會(huì)陰處及肛周皮膚以防感染。以上感染病例均得到有效控制，臨床癥狀消失。
2.3 出血的預(yù)防及護(hù)理 要密切觀察患兒口腔、鼻腔、皮膚黏膜、顱內(nèi)及胃腸道有無(wú)出血現(xiàn)象。定期監(jiān)測(cè)血常規(guī)，一般2~3 d 檢測(cè)1次，如血小板低于80×109/L，容易出現(xiàn)出血傾向，此時(shí)要絕對(duì)臥床休息，禁止溫水擦浴、熱敷，注意觀察皮膚及黏膜有無(wú)出血點(diǎn)。做各項(xiàng)護(hù)理操作時(shí)應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌技術(shù)，穿刺要準(zhǔn)確無(wú)誤，注射治療后要延長(zhǎng)穿刺點(diǎn)按壓時(shí)間，一般在5 min以上。發(fā)熱的患兒應(yīng)用藥物退熱時(shí)，要避免使用復(fù)方氨 基 比林、水 楊 酸 類(lèi) 藥 物，以免加重出血。顱內(nèi)出血是白血病患者常見(jiàn)的死亡原因之一，應(yīng)注意觀察患兒意識(shí)、瞳孔及生命體征的變化，若患兒突然出現(xiàn)視力模糊、頭暈、頭痛、呼吸急促、噴射性嘔吐，甚至昏迷，則提示有顱內(nèi)出血的可能，應(yīng)及時(shí)配合醫(yī)師搶救。本組有1例下消化道出血患兒，經(jīng)給予清淡、高熱量、易消化飲食，嚴(yán)禁辛辣、堅(jiān)硬及過(guò)熱的食物，并配合應(yīng)用止血藥物，出血3 d后停止。
2.4 化療藥物應(yīng)用時(shí)的靜脈護(hù)理 有些化療藥物，如長(zhǎng)春新堿、阿霉素、柔紅霉素等對(duì)皮膚刺激性較大，多次注射或藥液滲漏都會(huì)引起靜脈周?chē)M織炎癥或壞死，所以應(yīng)用時(shí)要注意：（1）血管的選擇，要盡量有計(jì)劃從遠(yuǎn)心端向近心端穿刺，并要求護(hù)理人員掌握熟練的靜脈穿刺技巧，避免反復(fù)穿刺血管。若藥物劑量過(guò)大，刺激性過(guò)強(qiáng)，應(yīng)首先選擇雙上肢粗直的血管注射。每次應(yīng)更換注射部位，若需要長(zhǎng)期注射化療藥物，最好使用PICC置管或靜脈港［5］。（2）靜脈注射前應(yīng)先用生理鹽水沖洗，確定針頭在靜脈內(nèi)方可注入藥物；靜脈注射時(shí)要邊抽回血邊注藥；藥物輸注完畢后再用生理鹽水10～20 ml沖洗后方可拔出針頭［6］，拔針后局部按壓數(shù)分鐘，以防藥物外滲或發(fā)生血腫。（3）輸注時(shí)疑有或已經(jīng)發(fā)生化療藥物外滲，立即停止注入，不宜立即拔針，應(yīng)由原部位抽取3～5 ml血液以除去部分藥液，拔除注射針，局部冷敷后再用25%硫酸鎂濕敷，也可用普魯卡因局部封閉。（4）本組中有1例已發(fā)生靜脈炎的患兒，我們采用患肢抬高制動(dòng)，礬冰液濕敷，紫外線燈照射，每日1次，每次30 min，28 d后癥狀基本消失。
3 小 結(jié)
綜上所述，兒童急性B淋巴細(xì)胞白血病變異表達(dá)CD13的患兒在做化療時(shí)，副作用和并發(fā)癥雖然比其他白血病化療時(shí)重，但只要我們通過(guò)提前預(yù)防、注意觀察、積極處理等一系列護(hù)理措施，患兒的痛苦就會(huì)降低到最小化，從而達(dá)到滿(mǎn)意的化療效果。
參考文獻(xiàn)
［1］ 劉桂蘭，張樂(lè)萍，陸愛(ài)東，等.短療程化療方案治療兒童標(biāo)危型B系急性淋巴細(xì)胞白血病65例分析［J］.中華兒科雜志，2006，44（12）：948-949.
［2］ 陳紅艷.臨終白血病患者家屬心理反應(yīng)調(diào)查及護(hù)理干預(yù)［J］.齊魯護(hù)理雜志，2008，14（17）:27-28.
［3］ 韓 靜,劉均娥,馬岳紅,等.白血病患兒對(duì)護(hù)士的期望［J］.護(hù)理研究，2011，25(6C)：1623-1624.
［4］ 范壯先.正確的漱口方法對(duì)白血病病人口腔感染的影響［J］.護(hù)理研究，2012，26(9B)：2458.
［5］ 梅俊輝,趙婷媛,劉 霞,等.急性白血病患者PICC置管時(shí)機(jī)對(duì)靜脈炎發(fā)生的影響［J］.齊魯護(hù)理雜志，2012，18(7)：22-23.
中圖分類(lèi)號(hào)：G622 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1002-7661（2016）11-133-01
國(guó)畫(huà)是中華民族的傳統(tǒng)繪畫(huà)，具有悠久的歷史，風(fēng)格獨(dú)特，自成體系，是和唐詩(shī)、宋詞、書(shū)法一樣成為世界文化精華，蘊(yùn)含了豐富的東方人文精神。大班幼兒通過(guò)對(duì)國(guó)畫(huà)的欣賞，讓幼兒從小就能了解祖國(guó)傳統(tǒng)繪畫(huà)的特點(diǎn)，懂得祖國(guó)民族藝術(shù)和偉大成就。在欣賞中潛移默化地受到感染，提高藝術(shù)修養(yǎng)。對(duì)中國(guó)畫(huà)審美特征的理解會(huì)敏銳我們的直覺(jué)，欣賞時(shí)再結(jié)合想象，方能領(lǐng)略作品的文化背景和氣韻、神韻、陶冶情懷。而這一切對(duì)于幼兒園的孩子來(lái)說(shuō)，的確有些難度。那么幼兒園的孩子應(yīng)該如何欣賞中國(guó)畫(huà)呢？在嘗試對(duì)大班幼兒開(kāi)展國(guó)畫(huà)欣賞的過(guò)程中，我發(fā)現(xiàn)了多媒體技術(shù)在幼兒學(xué)習(xí)理解中國(guó)畫(huà)在立意、構(gòu)圖、技法等特點(diǎn)方面起到了支持孩子理解和學(xué)習(xí)的作用。
一、借助聲光視頻等多媒體信息技術(shù)感受中國(guó)畫(huà)的構(gòu)思
國(guó)畫(huà)創(chuàng)作，以立意為先，許多繪畫(huà)理論家都首先強(qiáng)調(diào)這一點(diǎn)，不管是畫(huà)山水、畫(huà)人物、還是畫(huà)花鳥(niǎo)?！耙狻笔菑哪睦飦?lái)的？一是畫(huà)家對(duì)實(shí)現(xiàn)生活的豐富體察、創(chuàng)作經(jīng)驗(yàn)的充分積累；另一點(diǎn)便是畫(huà)家本人的修養(yǎng)，這樣在創(chuàng)作之先，畫(huà)什么，在頭腦中形成了成熟的構(gòu)思。那我們的孩子該怎樣體會(huì)畫(huà)家創(chuàng)作的“意”呢？多媒體信息技術(shù)就為我們通過(guò)了這樣的視覺(jué)空間。如：在欣賞宋代以畫(huà)梅花著名的《梅》，利用網(wǎng)絡(luò)視頻技術(shù)，孩子很容易就可以欣賞到佛寺中的冬梅勝景，理解畫(huà)家的“畫(huà)梅全決，生意為先”的理念。在欣賞李可染《清漓勝境圖》時(shí)，教師可以利用漓江視頻理解畫(huà)家將漓江勝景集于一圖的“意”以及畫(huà)家創(chuàng)作之畫(huà)，不落陳套，用意精當(dāng)，借景以生境，筆少而意多的意境。
二、利用視頻投影技術(shù)學(xué)習(xí)中國(guó)畫(huà)的造型規(guī)律
用于國(guó)畫(huà)的線條是有生命力的。抑揚(yáng)頓挫、疏密粗細(xì)、快慢虛實(shí)、濃淡干濕、無(wú)不顯示著畫(huà)家的才思、功底。國(guó)畫(huà)大師黃賓虹先生把繪畫(huà)的點(diǎn)線用五個(gè)字概括：“平”、“留”、“圓”、“重”、“變”。對(duì)于以形象思維占主導(dǎo)的幼兒園孩子來(lái)說(shuō)的確很難理解。所以只讓幼兒欣賞現(xiàn)成的作品還不夠，還要讓幼兒欣賞國(guó)畫(huà)的創(chuàng)作過(guò)程，在欣賞的時(shí)候利用視頻分解技術(shù)進(jìn)行分解示范，讓幼兒親眼目睹水、墨、色在宣紙上的滲化交融，使幼兒在干、濕、濃、淡、清構(gòu)成的水墨淋漓的情趣世界中得到無(wú)窮的樂(lè)趣，理解留：如屋漏痕，筆在運(yùn)行中感覺(jué)有阻力，在與紙摩擦的阻力中艱澀前行。重：如高山墜石用筆要用勁，要有力度，力透紙背；打點(diǎn)，像高山掉落的石頭那樣有份量。變：變化，筆畫(huà)形成多樣性對(duì)比，不雷同。
三、巧用網(wǎng)絡(luò)繪圖及透視工具理解中國(guó)畫(huà)的構(gòu)圖法則
中國(guó)畫(huà)的構(gòu)圖一般或作長(zhǎng)卷，或作立軸，表現(xiàn)特殊的意境和畫(huà)者的主觀情趣。不一定固定在一個(gè)立腳點(diǎn)作畫(huà)，也不受固定視域的局限，它可以根據(jù)畫(huà)者的感受和需要，使立腳點(diǎn)移動(dòng)作畫(huà)，把見(jiàn)得到的和見(jiàn)不到的景物統(tǒng)統(tǒng)攝入自己的畫(huà)面。這種透視的方法叫做散點(diǎn)透視或多點(diǎn)透視。如：在欣賞北宋名畫(huà)、張擇端的《清明上河圖》，用的就是散點(diǎn)透視法?！肚迕魃虾訄D》反映的是北宋城汴梁內(nèi)外豐富復(fù)雜、氣象萬(wàn)千的景象。它以汴河為中心，從遠(yuǎn)處的郊野畫(huà)到熱鬧的“虹橋” ；觀者既能看到城內(nèi)，又可看到郊野；既看得到橋上的行人，又看得到橋下的船；既看得到近處的樓臺(tái)樹(shù)木，又看得到遠(yuǎn)處縱深的街道與河港。而且無(wú)論站在哪一段看，景物的比例都是相近的，如果按照照片或是視頻看到的去畫(huà)，許多地方是根本無(wú)法畫(huà)出來(lái)的。這時(shí)就可以運(yùn)用到我們的美圖秀秀，黃金透視等網(wǎng)絡(luò)工具，將圖片進(jìn)行切割、透視及重組，孩子就很容易理解清明上河圖的構(gòu)圖方法的。
四、結(jié)合影音技術(shù)體會(huì)中國(guó)畫(huà)的意境
中國(guó)畫(huà)要求筆與墨合、情與景合、現(xiàn)實(shí)中無(wú)限豐富的景象，繪畫(huà)家以強(qiáng)烈的形象感染力。畫(huà)家憑借著這種感受，激起描繪這些景象的激情，于是作品作為情景相生的復(fù)寫(xiě)而重現(xiàn)，使情景交融在一起。如欣賞顧生岳《春臨東海》，這件作品場(chǎng)面十分壯觀，但由于畫(huà)面大，人物物件眾多，幼兒很難理解畫(huà)家所謳歌沿海漁民為爭(zhēng)高產(chǎn)而春節(jié)仍不休息的主題。利用視頻影音技術(shù)，讓圖中無(wú)數(shù)的大小船只動(dòng)起來(lái)，船帆層層疊疊，一眼看不到邊際；船上人頭攢動(dòng)，眾人都在忙碌之中觀看文藝演出。幼兒體驗(yàn)畫(huà)作所洋溢著一種喜氣洋洋、蓬勃向上的精神，充分了解畫(huà)家想要表現(xiàn)和謳歌的漁民生活。
【關(guān)鍵詞】 施普善；低氧；高二氧化碳血癥；學(xué)習(xí)記憶；半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3；海馬；大鼠
Abstract: Objective: To observe the effects of cerebrolysin on the learning-memory function and the changes of caspase-3 expression in the hippocampus of rats model with chronic hypoxia and hypercapnia，and to explore the probable mechanism. Methods: Thirty-two male S-D rats trained by eight-arm radial maze were pided into four groups: rats in the control group without treatment ；rats in chronic hypoxia and hypercapnia group were placed in the special closed cabin with hypoxia and hypercapnia for 8 hr a day， 6 day a week， 4 weeks and injected intraperitoneally with saline ；the rats in two treating group were injected intraperitoneally with 1 mg/kg and 2.5 mg/kg cerebrolysin， respectively. The learning-memory ability was measured using eight-arm radial maze and the expression of caspase-3 in the hippocampus was decteced with Western-blot.Results: Compared with the control group，the learning-memory ability was declined markedly and the expression of caspase-3 was increased significantly in chronic hypoxia and hypercapnia group. Nevertheless， the improvement of learning-memory and the less caspase-3 expression were observed in rats treated by two doses of cerebrolysin. Conclusion: Cerebrolysin may improve the learning-memory ability in rats with hypoxia and hypercapnia， which may be associated with the inhibition of the expressin of caspase-3 in the hippocampus.
Key words: Cerebrolysin；hypoxia；hypercapnia；learning-memory；caspase-3；hippocampus；rats
慢性阻塞性肺疾?。–OPD）患者存在不同程度的認(rèn)知功能障礙[1]，但其機(jī)制目前尚不清楚。王小同等[2]在一系列研究中，證實(shí)慢性低氧高二氧化碳動(dòng)物模型大鼠存在空間學(xué)習(xí)和記憶障礙。施普善含有85%的游離氨基酸和15%低分子量生物活性肽，極易通過(guò)血腦屏障，具有神經(jīng)保護(hù)和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用，已廣泛應(yīng)用于癡呆、腦卒中、腦外傷等引起的腦功能障礙治療，取得良好的臨床療效。本研究建立慢性低氧高二氧化碳大鼠模型，觀察施普善對(duì)其學(xué)習(xí)記憶功能障礙的治療作用及腦組織caspase-3蛋白表達(dá)的變化，并探討其可能的機(jī)制。
1 材料和方法
1.1 材料
常壓低氧高二氧化碳艙（溫州醫(yī)學(xué)院肺心病研究室研制），Medlab生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)（南京美易科技有限公司），八臂迷宮（溫州醫(yī)學(xué)院神經(jīng)藥理研究所），八臂迷宮飼餌（浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院），施普善（Cerebrolysin，奧地利Ebewe藥廠，批號(hào)608260），caspase-3 抗體（Cell Signaling Technology公司），GAPDH優(yōu)質(zhì)內(nèi)參（上?？党缮锕こ逃邢薰荆?/p>
1.2 動(dòng)物分組和模型制備
清潔級(jí)SD大鼠（溫州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）44只，體重280～310 g，經(jīng)八臂迷宮訓(xùn)練淘汰12只。32只大鼠隨機(jī)均分為4組：①對(duì)照組；②慢性低氧高二氧化碳組（模型組）；③慢性低氧高二氧化碳施普善（1 mL/kg）干預(yù)組（施普善1 mL/kg組）；④慢性低氧高二氧化碳施普善（2.5 mL/kg）干預(yù)組（施普善2.5 mL/kg組）。后3組大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)3 d后，置于常壓低氧高二氧化碳艙(氧濃度在9%～11%，二氧化碳濃度在5.5%～6.5%，艙內(nèi)溫度23～26 ℃，濕度50%～70%)內(nèi)，每天8 h，在入艙前半小時(shí)按規(guī)定劑量分別予以腹腔注射生理鹽水和施普善；其余16 h放置于正常環(huán)境中。每周6 d，連續(xù)4周。
1.3 行為學(xué)測(cè)試
八臂迷宮測(cè)試：訓(xùn)練方法參照文獻(xiàn)[3]方法進(jìn)行訓(xùn)練，稱(chēng)量自由攝食狀態(tài)下大鼠的體重，訓(xùn)練前大鼠禁食1 d，其后限食1 d，使其體重降至原體重的85%左右，在整個(gè)訓(xùn)練期間限食并維持原體重的85%左右。大鼠在迷宮中預(yù)適應(yīng)2 d，每天1次，第1天在八個(gè)臂中均撒上餌片任其自由攝食餌片10 min，第2天在固定的四臂中散上餌片（1、2、4、7臂），任其在迷宮中尋找食物10 min。訓(xùn)練時(shí)，在選定的（1、2、4、7）臂中放置餌片，該次序維持到訓(xùn)練結(jié)束不變，將大鼠放于迷宮中央?yún)^(qū)，用小桶蓋住，在迷宮中適應(yīng)15 s后提起小桶放出大鼠，大鼠可以自由選擇任意一臂攝取餌片。大鼠進(jìn)入有餌片的臂并攝取了餌片為一次正確的選擇不做記錄，重新進(jìn)入放餌片的臂稱(chēng)為工作記憶錯(cuò)誤（working memory error，WME），第一次進(jìn)入不放餌片的臂稱(chēng)為參考記憶錯(cuò)誤（reference memory error，RME），兩者之和為總的記憶錯(cuò)誤（total memory error，TE）。訓(xùn)練成功的標(biāo)準(zhǔn)：連續(xù)5次訓(xùn)練錯(cuò)誤選擇次數(shù)為≤1次，同時(shí)WME必須為零。
1.4 caspase-3測(cè)定
大鼠斷頭處死，全腦取出置于冰盤(pán)上，依次取出皮層、海馬，去除腦膜和血管，迅速稱(chēng)重后保存于液氮備用。取部分組織按1:10（密度:體積）加入細(xì)胞裂解液，冰上勻漿，13 000 g離心20 min收集上清液，BCA法測(cè)定蛋白濃度，等量蛋白(20～50μg)經(jīng)12%SDS-PAGE電泳后，電轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，5%脫脂奶粉TBST室溫封閉1 h；加入相應(yīng)一抗（Caspase-3及內(nèi)參抗體GAPDH，1:1 000）4 ℃孵育過(guò)夜，TBST洗膜3次；加入HRP標(biāo)記的相應(yīng)二抗（1:10 000）室溫?fù)u床孵育1 h，TBST洗膜3次；ECL試劑作用5 min，X光膠片曝光。沖洗并掃描后結(jié)果用quality one軟件分析雜交條帶灰度值，以GAPDH水平為內(nèi)對(duì)照。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法
組間比較采用單因素方差分析。
2 結(jié)果
2.1 各組八臂迷宮測(cè)試結(jié)果
與對(duì)照組比，模型組大鼠WME錯(cuò)誤次數(shù)和TE明顯增多，差異有顯著性（P
2.2 各組海馬中caspase-3的表達(dá)
如圖2所示。與對(duì)照組比，模型組海馬中caspase-3的表達(dá)明顯增高，差異有顯著性（3.287±0.682 vs 0.523±0.131，P
3 討論
本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M大鼠的WME，TE的錯(cuò)誤次數(shù)均明顯增加，而RME增加不明顯?？梢?jiàn)，慢性低氧高二氧化碳模型大鼠有空間學(xué)習(xí)記憶和工作記憶能力受損，且以短時(shí)記憶受損為著，與臨床上COPD患者的表現(xiàn)相似。
既往研究[4]發(fā)現(xiàn)，施普善具有類(lèi)似神經(jīng)生長(zhǎng)因子樣作用，可重建皮層微管相關(guān)蛋白水平，恢復(fù)神經(jīng)元正常細(xì)胞骨架，增加海馬和皮層樹(shù)突分支和突觸密度，影響血腦屏障葡萄糖載體的表達(dá)，增加大腦葡萄糖運(yùn)輸，改善神經(jīng)元的能量代謝，從而發(fā)揮其神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)活性。切除海馬穹隆傘造成學(xué)習(xí)記憶功能障礙的大鼠，給予施普善治療后，不僅改善記憶能力，而且改善獲得新信息的能力[5]。本實(shí)驗(yàn)顯示，施普善干預(yù)組大鼠的TE，WME，RME錯(cuò)誤次數(shù)較模型組明顯減少，認(rèn)知功能明顯改善，提示1 mL/kg和2.5 mL/kg兩種劑量施普善具有快速改善慢性低氧高二氧化碳引起的認(rèn)知功能障礙的作用。
動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，慢性低氧可導(dǎo)致腦組織結(jié)構(gòu)和功能的損害，細(xì)胞凋亡在其中起著重要作用。喻林升等[6]研究發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，慢性低氧高二氧化碳模型大鼠腦微血管和神經(jīng)元的超微結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，神經(jīng)元變性、壞死和凋亡，海馬神經(jīng)元的凋亡尤為明顯。徐浩等[7]實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證明，慢性低氧高二氧化碳可誘發(fā)大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡。已有研究報(bào)道，大鼠學(xué)習(xí)記憶功能受損與海馬神經(jīng)元的凋亡有密切關(guān)系[8]。Barhwal等[9]發(fā)現(xiàn)低氧環(huán)境中雄性Sprague Dawley大鼠水迷宮測(cè)試中工作記憶能力下降，海馬中凋亡蛋白如caspase-3表達(dá)明顯增高。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)模型組大鼠海馬的凋亡因子caspase-3表達(dá)顯著增強(qiáng)，而1 mL/kg和2.5 mL/kg兩種劑量施普善干預(yù)組大鼠海馬組織中caspase-3表達(dá)明顯下降?？梢?jiàn)，慢性低氧高二氧化碳增加了大鼠海馬組織的細(xì)胞凋亡，而施普善的干預(yù)抑制了大鼠海馬組織的細(xì)胞凋亡，從而減輕海馬組織的損害。
Hartbauer等[10]采用低血清（2%胎牛血清）培養(yǎng)基的雞胚端腦神經(jīng)元細(xì)胞應(yīng)激模型，觀察施普善對(duì)神經(jīng)元活性和程序性細(xì)胞死亡的影響，發(fā)現(xiàn)施普善治療后的培養(yǎng)基中神經(jīng)元，凋亡相關(guān)的染色質(zhì)改變顯著減少，證實(shí)腦施普善的肽類(lèi)成分具有抗凋亡作用，從而發(fā)揮長(zhǎng)期的神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)。Yuan等[11]等研究表明，施普善可能通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)，尤其通過(guò)caspase等因子的激活，從而引起細(xì)胞色素C釋放、Apaf-1復(fù)合體形成等發(fā)揮作用。當(dāng)然，施普善對(duì)于海馬神經(jīng)元抗凋亡的保護(hù)機(jī)制目前仍不清楚，有待進(jìn)一步的研究證實(shí)。
參考文獻(xiàn)
[1]Ozge C，Ozge A，Unale O. Cognitive and functional deterio-ration in patients with severe COPD[J]. Behav Neurol， 2006，17(2):121-130.
[2]王小同， 陳松芳， 邵勝敏， 等. 慢性低氧高二氧化碳對(duì)大鼠認(rèn)知功能與CREB表達(dá)的影響[J]. 溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，37(5):418-421.
[3]Huang YW， Chen Z， Hu WW， et al. Facilitating effect ofhistamine on spatial memory deficits induced by dizocilpineas evaluated by 8-arm radial maze in SD rat[J]. ActaPharmacol Sin， 2003， 24(12):1076-1270.
[4]Ruether E， Ritter R， Apecechea M， et al. Sustained improve-ments in patients with dementia of Alzheimer's type (DAT)6 months after termination of Cerebrolysin therapy[J].Jour-nal of Neural Transmission， 2000， 107(7):815-829.
[5]Francis-Turner L， Valouskova V. Nerve growth factor andnootropic drug Cerebrolysin but not fibroblast growth factorcan reduce spatial memory impairment elicited by fimbria-fornix transection: short-term study[J]. Neurosci Lett，1996，202(3):1-4.
[6]喻林升， 張旭， 高申孟. 慢性低O2高CO2大鼠腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡及P53蛋白表達(dá)研究[J].中國(guó)神經(jīng)免疫學(xué)和神經(jīng)病學(xué)雜志，2002，9(3):178-179.
[7]徐浩， 王小同， 徐漫歡， 等. 慢性低O2高CO2對(duì)小鼠神經(jīng)元凋亡及硝基酪氨酸表達(dá)的影響[J].溫州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)， 2007， 37(6):519-521.
[8]Lucassen PJ， Vollmann-Honsdorf GK， Gleisberg M， et al.Chronic Psychosocial stress differentially affects apOptosisin hippocampal subregions and Cortex of the adult tree shrew[J].Eur J Neurosci， 2001， 14(1):161-166.
關(guān)鍵詞：
新生兒缺血缺氧性腦病 血清 腦脊液
Observation on the Expression Change of Serum and Cerebrospinal Fluid Nerve Function and Interleukins of Newborns with Hypoxic Ischemic Encephalopathy
QIAO Yang-yang
Department of Pediatrics, The First Affiliated Hospital of Henan University of science and Technology;
Abstract：
Objective To investigate the expression change situation of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of newborns with hypoxic ischemic encephalopathy, in order to provide evidence for the diagnosis and treatment of disease.Methods 68 newborns with hypoxic ischemic encephalopathy in Zhumadian central hospital during the time of January 2016 to March 2018 were chosen as the observation group, 68 newborns without encephalopathy at the same time were chosen as the control group.Then the expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of control group and observation group at different stages were compared, and the expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of observation group with different severity at acute stage were compared too.Results The expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of observation group at different stages were all higher than those of control group, the expression levels of serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of with different severity at acute stage were compared, the differences were all statistically significant(P<0.05).Conclusion The serum and cerebrospinal fluid nerve function and interleukins of newborns with hypoxic ischemic encephalopathy show the satte of higher expression, and the expression differences of newborns at different stages and with different severity are obvious, so they have guided significance for the diagnosis and treatment of these newborns.
Keyword：
newborns with hypoxic ischemic encephalopathy;
新生兒缺血缺氧性腦病是新生兒的嚴(yán)重疾病之一，也是導(dǎo)致新生兒殘疾及死亡的重要疾病之一，其主要為由于宮內(nèi)窒息及分娩過(guò)程中的窒息對(duì)腦部的氧供不足而導(dǎo)致，因此患兒的腦損傷表現(xiàn)明顯，主要表現(xiàn)為腦水腫及腦壞死等情況，因此臨床對(duì)于本類(lèi)新生兒進(jìn)行神經(jīng)功能狀態(tài)相關(guān)指標(biāo)表達(dá)的變化研究意義極為重要[1,2]。另外，機(jī)體損傷過(guò)程中，炎性應(yīng)激及神經(jīng)毒性作用等方面也是研究的重點(diǎn)，而白細(xì)胞介素中的較多指標(biāo)在此方面的反應(yīng)價(jià)值較高[3],因此對(duì)白細(xì)胞介素在本類(lèi)新生兒中的表達(dá)研究也十分必要。本研究就新生兒缺血缺氧性腦病血清及腦脊液神經(jīng)功能及白細(xì)胞介素表達(dá)變化情況進(jìn)行觀察與探究，以疾病的診斷與治療提供參考依據(jù)，現(xiàn)將報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取醫(yī)院2016年1月至2018年3月期間治療的68例缺血缺氧性腦病新生兒為觀察組，同時(shí)期的68例無(wú)腦病新生兒為對(duì)照組。對(duì)照組中包括男童38例，女童30例；胎齡為(37.0～42.2)周，平均為(40.1±0.8)周；出生體重為(2 512～4 658)g, 平均為(3 045.8±310.7)g。觀察組中包括男童37例，女童31例；胎齡為(37.0～42.1)周，平均為(40.3±0.7)周；出生體重為(2 510～4 668)g, 平均為(3 050.1±312.3)g; 嚴(yán)重程度：輕度者28例，中度者22例，重度者18例。兩組新生兒的性別、胎齡與出生體重等方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。兩組新生兒之間具有可比性。
1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)
納入標(biāo)準(zhǔn)：胎齡≥37周者；單胎者；家長(zhǎng)對(duì)研究知情同意者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他先天性疾病者；合并其他腦部或神經(jīng)系統(tǒng)疾病者；合并產(chǎn)傷者；合并感染者；合并代謝性疾病者。
1.3 檢測(cè)方法
采集對(duì)照組和觀察組的靜脈血標(biāo)本與腦脊液標(biāo)本，其中觀察組分別于急性期和恢復(fù)期各采集1次，然后將血標(biāo)本離心，以醫(yī)用離心機(jī)進(jìn)行離心，3 000 r/min(離心半徑15 cm)離心5.0 min, 取血清進(jìn)行檢測(cè)。其中神經(jīng)功能指標(biāo)為神經(jīng)元特異性烯醇酶(neuron-specific enolase, NSE)、S100B蛋白(S-100B protein, S100B)及髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein, MBP),白細(xì)胞介素指標(biāo)為IL-6、IL-8及IL-1β,分別以上述6項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)應(yīng)的酶聯(lián)免疫法(ELISA法)試劑盒進(jìn)行定量檢測(cè)。比較兩組不同分期的血清及腦脊液神經(jīng)功能及白細(xì)胞介素表達(dá)水平，同時(shí)比較觀察組急性期時(shí)不同嚴(yán)重程度者的血清及腦脊液神經(jīng)功能及白細(xì)胞介素表達(dá)水平。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
研究中的數(shù)據(jù)檢驗(yàn)軟件為SPSS 23.0,計(jì)數(shù)資料以χ2檢驗(yàn)處理，計(jì)量資料以t檢驗(yàn)處理，重復(fù)測(cè)量的計(jì)量資料則以方差分析處理， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié) 果
2.1 兩組的血清神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)比較
觀察組不同分期的血清神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)水平均高于對(duì)照組，觀察組急性期時(shí)不同嚴(yán)重程度者的血清神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)水平比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1、2。
表1 兩組血清神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)比較 (xˉ±s)
2.2 兩組腦脊液神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)比較
觀察組不同分期的腦脊液神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)水平均高于對(duì)照組，觀察組急性期時(shí)不同嚴(yán)重程度者的腦脊液神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表3、4。
表2 觀察組中不同嚴(yán)重程度者的血清神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)比較（±s)
表3 兩組腦脊液神經(jīng)功能指標(biāo)表達(dá)比較 (xˉ±s)
表4 觀察組中不同嚴(yán)重程度者腦脊液神經(jīng) 功能指標(biāo)表達(dá)比較(xˉ±s)
2.3 兩組的血清白細(xì)胞介素表達(dá)比較
觀察組不同分期的血清白細(xì)胞介素指標(biāo)表達(dá)水平均高于對(duì)照組，觀察組急性期時(shí)不同嚴(yán)重程度者的血清白細(xì)胞介素指標(biāo)表達(dá)水平比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表5、6。
表5 兩組血清白細(xì)胞介素指標(biāo)表達(dá)比較 (xˉ±s)
2.4 兩組的腦脊液白細(xì)胞介素表達(dá)比較
觀察組不同分期的腦脊液白細(xì)胞介素指標(biāo)表達(dá)水平均高于對(duì)照組，觀察組急性期時(shí)不同嚴(yán)重程度者的腦脊液指標(biāo)表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表7、8。
表6 觀察組中不同嚴(yán)重程度者的血清白細(xì)胞 介素指標(biāo)表達(dá)比較(xˉ±s)
表7 兩組腦脊液白細(xì)胞介素指標(biāo)表達(dá)比較 (xˉ±s)
表8 觀察組中不同嚴(yán)重程度者的腦脊液白細(xì)胞 介素指標(biāo)表達(dá)比較(xˉ±s)
3 討 論
新生兒缺血缺氧性腦病是由于胎兒宮內(nèi)窒息及分娩過(guò)程中缺氧而導(dǎo)致的一類(lèi)腦部損傷，腦組織因缺血缺氧而出現(xiàn)相應(yīng)的損害，因此與神經(jīng)功能相關(guān)的指標(biāo)變化一直較為突出[4,5]。臨床中與神經(jīng)損害指標(biāo)相關(guān)的研究顯示，NSE、S100B及MBP等指標(biāo)在神經(jīng)損害發(fā)生發(fā)展中的變化研究意義較高[6,7],其中NSE是神經(jīng)元軸突損傷的重要反應(yīng)指標(biāo)，S100B則具有神經(jīng)生長(zhǎng)與損傷的重要反應(yīng)指標(biāo)，維持神經(jīng)髓鞘結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定，對(duì)神經(jīng)組織的損傷特異性具有較高的反映價(jià)值。當(dāng)神經(jīng)系統(tǒng)受損時(shí)，神經(jīng)細(xì)胞受損崩解，其被釋放入血的同時(shí)，神經(jīng)修復(fù)方面被激活，故表達(dá)明顯異常。并且研究指標(biāo)在神經(jīng)元壞死后被釋放出來(lái)，進(jìn)入腦脊液中，而血腦屏障及通透性的變化進(jìn)一步導(dǎo)致其滲透至血液中，因此血液中的表達(dá)水平隨之升高[8,9]。另外，白細(xì)胞介素指標(biāo)中的IL-6、IL-8及IL-1β等在機(jī)體損傷，包括神經(jīng)損傷過(guò)程中，應(yīng)激性變化，除與炎性應(yīng)激反應(yīng)有關(guān)外，其神經(jīng)毒性及神經(jīng)元損傷保護(hù)機(jī)制等也表現(xiàn)突出，且有研究[10～12]認(rèn)為，其炎性損傷也是其表達(dá)檢測(cè)的一個(gè)重要因素。臨床中關(guān)于上述指標(biāo)在缺血缺氧性腦病新生兒的血清及腦脊液中的變化研究可見(jiàn)，但是對(duì)于其在本類(lèi)新生兒疾病不同時(shí)期與嚴(yán)重程度者中的變化研究差異較大。
本研究就新生兒缺血缺氧性腦病血清及腦脊液神經(jīng)功能及白細(xì)胞介素表達(dá)變化情況進(jìn)行觀察，結(jié)果顯示，缺血缺氧性腦病新生兒在急性期與恢復(fù)期血清及腦脊液神經(jīng)功能及白細(xì)胞介素表達(dá)水平均高于非腦病新生兒，且急性期時(shí)缺血缺氧性腦病新生兒中重度患兒的血清及腦脊液神經(jīng)功能及白細(xì)胞介素表達(dá)水平高于輕度及中度患兒，而中度患兒則高于輕度患兒，說(shuō)明急性期的神經(jīng)損傷發(fā)生后其被釋放入腦脊液中的量增加，而隨著時(shí)間的推移[13,14],其表達(dá)降低，且神經(jīng)受損越為嚴(yán)重，其釋放量越大，在腦脊液與血液中的表達(dá)水平也越高[15,16]。洪菲等[6]及杜逸亭等[12]研究則顯示S100B及NSE變化在此類(lèi)患兒中較為顯著，呈現(xiàn)升高的趨勢(shì)，但是在輕度、中度及重度患兒中呈現(xiàn)差異不顯著，尤其是輕度患兒中的差異不明顯。盛紅玲等[15]研究顯示，IL-6在缺血缺氧性腦病新生兒中呈現(xiàn)動(dòng)態(tài)變化，且變化對(duì)治療效果及預(yù)后具有一定反映價(jià)值，但是其對(duì)于不同嚴(yán)重程度患兒的差異研究不足，Moon CJ等[16]研究則肯定了其對(duì)于嚴(yán)重程度的反映價(jià)值，與本研究基本一致。
綜上所述，我們認(rèn)為新生兒缺血缺氧性腦病血清及腦脊液神經(jīng)功能及白細(xì)胞介素呈現(xiàn)高表達(dá)狀態(tài)，且不同分期與嚴(yán)重程度患兒的表達(dá)差異明顯，因此認(rèn)為對(duì)缺血缺氧性腦病新生兒進(jìn)行上述指標(biāo)的檢測(cè)價(jià)值較高。
參考文獻(xiàn)
[1] 袁二偉，張雅靜，曲海新，等.經(jīng)顱彩色多普勒超聲聯(lián)合血清NSE在新生兒缺血缺氧性腦病早期診斷中的意義[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2016,16(36):7 147-7 150.
[2] 劉冬麗，錢(qián)東星，余鳳娟，等.血清S-100B蛋白在新生兒缺氧缺血性腦病中的應(yīng)用價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)用神經(jīng)疾病雜志，2016,19(7):126-127.
[3] Chaparro-Huerta V,Flores-Soto ME,Merin Sigala ME,et al.Proinflammatory Cytokines,Enolase and S-100 as Early Biochemical Indicators of Hypoxic-Ischemic Encephalopathy Following Perinatal Asphyxia in Newborns[J].Pediatr Neonatol,2017,58(1):70-76.
[4] 黃永昌.血清NSE LDH及CRP水平動(dòng)態(tài)檢測(cè)在新生兒缺氧缺血性腦病病情評(píng)估中的臨床意義[J].浙江臨床醫(yī)學(xué)，2016,18(8):1 455-1 456.
[5] 張愛(ài)斌.新生兒缺氧缺血性腦病血清TNF-α和IL-6動(dòng)態(tài)變化及臨床分析[J].中西醫(yī)結(jié)合心血管病雜志(電子版),2017,5(20):83-84.
[6] 洪菲，趙金華，徐明.血清S-100B蛋白和臍動(dòng)脈血?dú)夥治雎?lián)合檢測(cè)在早期預(yù)測(cè)心肌梗死新生兒缺氧缺血性腦病中的研究[J].國(guó)際心血管病雜志，2017,44(A01):177.
[7] Saito J,Shibasaki J,Shimokaze T,et al.Temporal Relationship between Serum Levels of Interleukin-6 and C-Reactive Protein in Therapeutic Hypothermia for Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy[J].Am J Perinatol,2016,33(14):1 401-1 406.
[8] Chaparro-Huerta V,Flores-Soto ME,Merin Sigala ME,et al.Proinflammatory Cytokines,Enolase and S-100 as Early Biochemical Indicators of Hypoxic-Ischemic Encephalopathy Following Perinatal Asphyxia in Newborns[J].Pediatr Neonatol,2017,58(1):70-76.
[9] Al-Shargabi T,Govindan RB,Dave R,et al.Inflammatory cytokine response and reduced heart rate variability in newborns with hypoxic-ischemic encephalopathy[J].J Perinatol,2017,37(6):668-672.
[10] Sumanovic-Glamuzina D,Culo F,Culo MI,et al.A comparison of blood and cerebrospinal fluid cytokines (IL-1β,IL-6,IL-18,TNF-α) in neonates with perinatal hypoxia[J].Bosn J Basic Med Sci,2017,17(3):203-210.
[11] Al-Shargabi T,Govindan RB,Dave R,et al.Inflammatory cytokine response and reduced heart rate variability in newborns with hypoxic-ischemic[J].J Perinatol,2017,37(6):668-672.
[12] 杜逸亭，高淑強(qiáng)，李彪，等.高壓氧聯(lián)合GM-1治療對(duì)新生兒缺血缺氧性腦病患兒血清Bcl-2、NSE和NF-κB的影響[J].解放軍醫(yī)藥雜志，2017,29(12):61-63.
[13] Yang L,Li D,Chen S.Hydrogen water reduces NSE,IL-6,and TNF-α levels in hypoxic-ischemic encephalopathy[J].Open Med (Wars),2016,11(1):399-406.
[中圖分類(lèi)號(hào)] R725.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2015）09（b）-0085-03
Expreesion of endogenous hydrogen sulfide in serum in children with bronchial asthma and its correlativity with respiratory function
TANG Dan1 XIA Wan-min2
1.Department of Pediatrics，the Second Clinical College of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Chengdu 611137，China；2.Department of Respiration，Women and Children′s Central Hospital of Chengdu City，Chengdu 610017，China
[Abstract] Objective To explore expressive level of endogenous hydrogen sulfide （H2S） in serum in children with bronchial asthma and its correlativity with respiratory function. Methods 50 children with bronchial asthma in acute attack stage from December 2013 to December 2014 in our hospital was selected as the acute attack group，50 children with bronchial asthma in remission stage were selected as the remission group and 50 cases of healthy children were selected as the control group during the same period.Endogenous H2S was detected with sensitive sulphur electrode and respiratory function was detected with lung function diagnostic system in every groups.The expression level of endogenous H2S，the index of forced vital capacity（FVC），forced expiratory volume in 1 second （FEV1%），maximal mid-expiratory flow （MMEF） among three groups was compared respectiveiy，and relativity of H2S with FVC，F(xiàn)EV1% and MMEF was analyzed in acute attack group. Results The level of H2S in the acute attack group and the remission group was lower than that in the control groups，with significant difference（P
[Key words] Endogenous hydrogen sulfide；Bronchial asthma；Forced vital capacity；Forced expiratory volume in 1 second；Maximal mid-expiratory flow
支氣管哮喘是兒童期最常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)疾病之一，全球每年大約有670萬(wàn)兒童被診斷為哮喘，我國(guó)近年來(lái)的調(diào)查資料也顯示[1]，國(guó)內(nèi)小兒哮喘發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，哮喘已成為影響全球兒童健康的主要疾病之一。內(nèi)源性硫化氫（H2S）是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的氣體信號(hào)分子。有研究顯示[2]，在急、慢性肺病發(fā)病過(guò)程中，H2S可能參與肺功能損傷的過(guò)程，在小兒支氣管哮喘的發(fā)病過(guò)程中，H2S是否參與其肺功能損傷以及對(duì)H2S進(jìn)行檢測(cè)是否具有臨床意義目前尚缺乏研究。本研究就支氣管哮喘患兒H2S的表達(dá)情況以及其對(duì)呼吸功能的影響進(jìn)行研究，旨在探討H2S在小兒支氣管哮喘發(fā)病中的作用。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取2014年1月～2014年12月成都市婦女兒童中心醫(yī)院呼吸科收治的50例支氣管哮喘急性發(fā)作期患兒作為急性發(fā)作組，其中男29例，女21例；年齡6～11歲，平均（8.9±3.2）歲。選取同期的50例支氣管哮喘臨床緩解期患兒作為緩解組，其中男30例，女20例；年齡6～12歲，平均（8.6±2.8）歲。支氣管哮喘急性發(fā)作期及臨床緩解期診斷符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)會(huì)呼吸學(xué)組2008年修訂的小兒支氣管哮喘診斷和防治指南標(biāo)準(zhǔn)。選取同期體檢的正常健康兒童50例作為對(duì)照組，其中男28例，女22例；年齡6～12歲，平均（8.4±3.1）歲。排除合并先天性心血管疾病患兒、胸廓病變患兒、免疫系統(tǒng)疾病患兒。3組的性別、年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。所有患兒監(jiān)護(hù)人對(duì)研究?jī)?nèi)容知情同意，且經(jīng)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。
1.2 標(biāo)本采集
各組患兒入選后，次日清晨采集空腹靜脈血1 ml，立即在4℃條件下低溫離心10 min，離心機(jī)轉(zhuǎn)速3000 r/min，獲得血清后深低溫冰箱-70℃密封保存，用于測(cè)定H2S含量。
1.3 H2S檢測(cè)
內(nèi)源性H2S檢測(cè)采用敏感硫電極法，配制標(biāo)準(zhǔn)S2-溶液，梯度稀釋?zhuān)舾辛螂姌O及參比電極（上海雷磁公司）采用去離子水沖洗3次，一同浸入標(biāo)本中，檢測(cè)S2-濃度，依據(jù)S2-濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，血清標(biāo)本解融后，加入抗氧化液后，敏感硫電極及參比電極一同浸入標(biāo)本中，讀數(shù)穩(wěn)定后記錄，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算檢測(cè)標(biāo)本內(nèi)源性H2S濃度。
1.4 呼吸功能檢測(cè)
氣道功能檢測(cè)采用德國(guó)耶格Masterscope Apspro肺功能檢測(cè)儀，由專(zhuān)業(yè)醫(yī)師進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)前對(duì)受檢小兒進(jìn)行指導(dǎo)，采用坐立位進(jìn)行檢測(cè)，重復(fù)檢測(cè)3次，檢測(cè)指標(biāo)包括用力肺活量（FVC）、第一秒最大呼氣率（FEV1%）、最大呼氣中期流速（MMEF）。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料以x±s表示，采用t檢驗(yàn)，組間比較采用SLN-q檢驗(yàn)，相關(guān)性檢驗(yàn)采用線性相關(guān)分析，以P
2 結(jié)果
2.1 3組血清H2S水平及呼吸功能的比較
急性發(fā)作組和緩解組的血清H2S水平顯著低于對(duì)照組，急性發(fā)作組的血清H2S水平顯著低于緩解組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
表1 3組血清H2S水平及呼吸功能的比較（x±s）
與緩解組比較，*P
2.2 急性發(fā)作期血清H2S與呼吸功能參數(shù)的相關(guān)性分析
相關(guān)性分析結(jié)果顯示，急性發(fā)作組的血清H2S水平與FVC呈正相關(guān)（r=0.302，P=0.008），H2S水平與FEV1%呈正相關(guān)（r=0.349，P=0.004），H2S水平與MMEF水平呈正相關(guān)（r=0.446，P=0.001）。
3 討論
支氣管哮喘是兒童期最常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)疾病之一，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，是由多種炎性細(xì)胞和細(xì)胞組分共同參與的氣道慢性炎癥，氣道高反應(yīng)性是發(fā)病的中心環(huán)節(jié)，在感染，接觸物理、化學(xué)、生物等刺激因素的作用下發(fā)生廣泛多變的可逆性氣道受限，引起急性發(fā)作，導(dǎo)致氣道功能急劇下降，進(jìn)而引起呼吸功能障礙。近年來(lái)的研究顯示[4-5]，支氣管哮喘患者體內(nèi)氣體信號(hào)分子在疾病進(jìn)展中具有重要作用，如一氧化氮等，對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)對(duì)于預(yù)測(cè)患者肺功能和疾病嚴(yán)重程度具有重要意義
H2S是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的新的氣體信號(hào)分子，在體內(nèi)以L-半胱氨酸為底物，在CBS和CSE兩種酶的催化下生成[5-6]。CBS和CSE廣泛分布于體內(nèi)，尤其在血管組織、肺組織及肝組織等表達(dá)水平較高。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)[7-8]，H2S在呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)病中具有重要作用，其能夠調(diào)節(jié)氣道平滑肌功能，而且能夠作為炎性介質(zhì)參與氣道炎癥的發(fā)展過(guò)程，在支氣管哮喘患者中，其表達(dá)水平同炎性細(xì)胞在氣道的趨化作用及激活具有密切關(guān)系[9-10]。在對(duì)支氣管哮喘患兒的檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，H2S在支氣管哮喘患兒的血清中表達(dá)水平明顯降低，而且在急性發(fā)作期降低的水平更為明顯；對(duì)呼吸功能的檢測(cè)也證實(shí)，F(xiàn)VC、FEV1%和MMEF水平在支氣管哮喘患兒明顯降低。FVC、FEV1%能夠反映大氣道功能，MMEF能夠反映小氣道功能，提示在支氣管哮喘患兒中，大氣道和小氣道功能同時(shí)受損。進(jìn)一步的研究顯示，在急性發(fā)作期的支氣管哮喘患兒中，H2S水平同患兒FVC、FEV1%和MMEF水平呈現(xiàn)正相關(guān)，提示H2S表達(dá)降低同患兒大氣道及小氣道的功能受損具有密切關(guān)系，可能參與氣道功能受損的過(guò)程。有研究顯示[11-12]，在肺動(dòng)脈高壓時(shí)，H2S能夠參與對(duì)氣道平滑肌功能的調(diào)節(jié)，而且參與氣道組織的重塑過(guò)程，而采用外源性H2S，能夠改善氣道平滑肌功能，舒張氣道，改善呼吸功能，因此推測(cè)患兒FVC、FEV1%大氣道功能指標(biāo)的下降，可能與患兒內(nèi)源性H2S水平下降，對(duì)氣道平滑肌調(diào)節(jié)功能降低有關(guān)。此外，有研究顯示[13-15]，支氣管哮喘患者內(nèi)源性硫化氫與氣道炎癥及炎性介質(zhì)的表達(dá)密切相關(guān)，內(nèi)源性H2S能夠抑制氣道吞噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等炎癥細(xì)胞的表達(dá)，同時(shí)能夠降低白細(xì)胞介素等炎癥因子的表達(dá)，從而降低氣道炎癥及其激發(fā)的氣道痙攣等，在支氣管哮喘患兒中，小氣道功能的降低可能與H2S水平降低對(duì)氣道炎癥抑制作用的下降有關(guān)。
H2S在支氣管哮喘患兒血清中的表達(dá)水平降低，而且與大氣道及小氣道功能密切相關(guān)，提示H2S參與小兒支氣管哮喘呼吸功能受損的過(guò)程，H2S水平檢測(cè)對(duì)小兒支氣管哮喘活動(dòng)度及病情嚴(yán)重程度具有一定的預(yù)測(cè)價(jià)值。
[參考文獻(xiàn)]
[1] 鄭禮林，倪陳，陸偉，等.0～14a兒童支氣管哮喘流行病學(xué)調(diào)查[J].疾病控制雜志，2003，7（5）：408-410.
[2] 陳嘉馨，陸家政，黎惠貞，等.血漿硫化氫水平與支氣管哮喘的相關(guān)性研究[J].中外醫(yī)療，2012，16（16）：75-79.
[3] 安淑華，田文秋，李金英.呼出氣一氧化氮檢測(cè)在幼兒支氣管哮喘中的應(yīng)用分析[J].中國(guó)當(dāng)代兒科雜志，2015，17（2）：134-137.
[4] ZhaoW，Zhang J，Lu Y，et al.The vasorelaxant effect of H2S as a novel endogenous gaseous KATP channel opener[J].EMBO J，2001，20（21）：6008-6016.
[5] Wang R.The gasotransmitter role of hydrogen sulfide[J].Antioxid Redox Signal，2003，5（4）：493-501.
[6] 王燕飛，金紅芳，唐朝樞，等.氣體信號(hào)分子在肺動(dòng)脈高壓發(fā)病中的作用[J].北京大學(xué)學(xué)報(bào)?醫(yī)學(xué)版，2006，38（3）：326-330.
[7] 伍蕊，姚婉貞，陳亞紅，等.支氣管哮喘患者血漿中硫化氫的變化及其意義[J].北京大學(xué)學(xué)報(bào)?醫(yī)學(xué)版，2008，40（5）：505-508.
[8] 方麗，李昌崇，童夏生，等.內(nèi)源性硫化氫和胱硫醚-β-合成酶mRNA在支氣管哮喘大鼠中的表達(dá)及意義[J].中華哮喘雜志?電子版，2009，3（4）：254-257.
[9] 許益笑，王園園，賈旭廣，等.內(nèi)源性硫化氫體系與低O2高CO2性肺動(dòng)脈高壓的相關(guān)性研究[J].中國(guó)應(yīng)用生理學(xué)雜志，2011，27（3）：300-304.
[10] 楊惠蓮，靳國(guó)恩，馬祁生，等.外源性硫化氫對(duì)急性高原低氧大鼠肺動(dòng)脈壓的影響[J].青海醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011， 32（3）：164-168，171.
[11] 孟祥艷，魯中，凌亦凌，等.氣體信號(hào)分子硫化氫在脂多糖誘導(dǎo)大鼠肺急性炎癥反應(yīng)中的作用[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2005，26（2）：231-331.
[12] 李春華，李家樹(shù)，費(fèi)海濤，等.哮喘患者血清硫化氫水平與白細(xì)胞介素35的相關(guān)性分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2013，42（35）：4311-4313.
[13] 伍蕊，陳亞紅，姚婉貞，等.硫化氫供體對(duì)急性支氣管哮喘大鼠尾加壓素Ⅱ表達(dá)的影響[J].中國(guó)病理生理雜志，2010，26（9）：1781-1785.
