時(shí)間：2023-01-12 14:42:56
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【關(guān)鍵詞】 血細(xì)胞分析儀;使用評價(jià);總變異系數(shù)
Abstract Objective： To evaluate the primary function of 3 kinds of hematology analyzers( SYSMEXKX-21N，ABBOTT CD-3200 and BEKMAN-COULTER AC.T 5diff) by examining anticoagulation blood samples from randomized patients. Methods: 3 kinds of hematology analyzers were employed to measure total variation coefficient and the precision of WBC，RBC，HBG and PLT with quality appraisal specimens from Clinical laboratory of the Ministry of Health and anticoagulation blood samples from randomized inpatients . Results: There was no remarkable difference in total variation coefficient of WBC， RBC and HBG from three kinds of Hematology Analyzers. But total variation coefficient of PLT(4.85 %) from CD-3200 is higher than those from others. Conclusion: SYSMEXKX-21N，ABBOTT CD-3200 and BEKMAN-COULTER AC.T 5diff， three kinds of hematology analyzers， can be applied to clinical laboratory determination， with much attention paid to the platelet count of Abbott CD-3200 Hematology Analyzer in clinical practice.
Key words Hematology analyzer; Evaluation; Total coefficient of variation
血常規(guī)是臨床工作中常用的一種檢測手段，為臨床診斷和治療提供有價(jià)值的參考數(shù)據(jù)，越來越受到醫(yī)療工作者的重視。使用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血常規(guī)分析是目前臨床最常用的手段，具有操作簡便、檢測速度快、精確度高的優(yōu)勢。其檢測值直接指導(dǎo)著臨床工作，是病人進(jìn)行治療的重要參考指標(biāo)[1];對疾病的診斷與治療有著重要的意義。而血細(xì)胞分析儀的質(zhì)量直接關(guān)系到血細(xì)胞數(shù)值的準(zhǔn)確，為此對我科采用的三種血細(xì)胞分析儀進(jìn)行了比較分析，以期為今后的血細(xì)胞分析、檢測、血細(xì)胞分析儀的選擇提供一定的參考。
1 材料與方法
1.1 材料 采用120例我院隨機(jī)住院病人抗凝全血的標(biāo)本和衛(wèi)生部提供的臨檢室血細(xì)胞質(zhì)量評比液，批號：2008221、2008222、2008223、2008224、2008225。每日對評比液測定1次，連續(xù)1月，然后對各臺儀器測定結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
1.2 儀器類型 SYSMEXKX-21N(日本SYSMEX公司生產(chǎn))、雅培CD-3200(美國ABBOTT公司生產(chǎn))、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff(美國BEKMAN-COULTER公司生產(chǎn))。
1.3 試劑 均為廠家生產(chǎn)的配套試劑。
1.4 操作方法 嚴(yán)格按照按說明書操作程序進(jìn)行，測定前用質(zhì)控校正儀器。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件隨機(jī)資料方差分析法，P
2 結(jié)果
2.1 總變異系數(shù)測定 采用衛(wèi)生部提供的臨檢室血細(xì)胞質(zhì)量評比液，批號同上。按下列公式求出其總變異系數(shù)(TCV)[2)。設(shè)標(biāo)本數(shù)為u，各標(biāo)本測定次數(shù)為n，標(biāo)本間的離均差平方和為SSQ，則：TCV=SSQ/u(n-1)X×100 %。
血細(xì)胞分析儀SYSMEXKX-21N、雅培CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff的總變異系數(shù)結(jié)果表明：白細(xì)胞(WBC)總變異系數(shù)在三種儀器分別為1.34 %、1.16 %、1.33 %;紅細(xì)胞(RBC)總變異系數(shù)分別為0.57 %、0.57 %、0.77 %;血紅蛋白(HBG)總變異系數(shù)分別為0.59 %、0.46 %、0.60 %;血小板(PLT)的總變異系數(shù)分別為1.29 %、4.85 %、1.65 %。
2.2 標(biāo)本測定 120例我院隨機(jī)住院病人抗凝全血標(biāo)本，分別于三種血細(xì)胞分析儀進(jìn)行標(biāo)本檢測，并運(yùn)用SPSS13.0版隨機(jī)資料方差分析(ANOVA)，對檢測結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示。三種分析儀檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，詳見表1。表1 WBC、PLT、RBC、HBG三種儀器檢測結(jié)果(26.54.31±1.17131.2±29.1CD-32001206.33±3.76207.8±122.64.07±1.08133.3±30.3AC.T 5diff1206.65±4.02202.1±131.14.33±1.18128.7±29.6F值0.06120.02170.04090.0320
注：各組均P>0.05
3 討論
SYSMEXKX-21N血細(xì)胞分析儀是三分群電阻式血細(xì)胞原理，根據(jù)細(xì)胞體積分布直方圖進(jìn)行分析和計(jì)算。ABBOTT CD-3200是細(xì)胞五項(xiàng)分類多角度偏振光散射法(MAPSS)原理，根據(jù)標(biāo)本在水動力聚焦系統(tǒng)的作用下進(jìn)入檢測部，在激光束的照射下，細(xì)胞在多個(gè)角度都產(chǎn)生散射光，根據(jù)計(jì)算將結(jié)果分類得到。AC.T 5diff血細(xì)胞分析儀運(yùn)用細(xì)胞化學(xué)光吸收和體積分布技術(shù)(Absorbance cytochemistry and Volume，AcV)進(jìn)行細(xì)胞五項(xiàng)分類[2]。
隨著醫(yī)療市場的變革，臨床和患者對檢驗(yàn)科提出了更高的要求，需要更多的診斷指標(biāo)，更快的檢測速度，更低的檢測費(fèi)用，最重要的是更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)，在臨床工作中運(yùn)用更快速、更準(zhǔn)確、重復(fù)性好且成本合理的血細(xì)胞分析儀是大勢所趨，滿足臨床不同標(biāo)本檢測要求，而每臺儀器的質(zhì)量高低，所檢測標(biāo)本的準(zhǔn)確性對臨床工作影響甚大。為此我們對SYSMEXKX-21N、ABBOTT CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff三種血細(xì)胞分析儀測試結(jié)果進(jìn)行分析。
為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、權(quán)威性，我們采用衛(wèi)生部提供的臨檢室血細(xì)胞質(zhì)量評比液，計(jì)算WBC、RBC、HBG、PLT的總變異系數(shù)(TCV)，結(jié)果WBC、RBC、HGB總變異系數(shù)相差不大;PLT的總變異系數(shù)分別為1.29 %、4.85 %、1.65 %。顯示雅培CD-3200血細(xì)胞分析儀在血小板(PLT)的測試中，其總變異系數(shù)(4.85 %)較大，與已報(bào)道文獻(xiàn)(4.92 %)[3]相近，在我們臨床工作和血細(xì)胞分析儀的選擇中值得注意。因SYSMEXKX-21N、雅培CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff相關(guān)性、線性、交叉污染率、重復(fù)性等已有報(bào)道[4-6]，故在此不進(jìn)行分析。
120例我院隨機(jī)住院病人抗凝全血標(biāo)本，其檢測結(jié)果值有高有低，數(shù)據(jù)具有一定的代表性，可以反映基本的臨床情況;WBC、RBC、HBG、PLT隨機(jī)資料方差分析，三種分析儀檢測結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明SYSMEXKX-21N、ABBOTT CD-3200、BEKMAN-COULTER AC.T 5diff血細(xì)胞分析儀均可運(yùn)用于臨床檢測中，可為臨床服務(wù)。
參考文獻(xiàn)
[1] 熊立凡.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].3版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2003:80-81.
[2] 徐孝倫，秦育濱，劉雁翔.CD1200血細(xì)胞分析儀的應(yīng)用評價(jià)[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2006，25(3)：140-142.
[3] Ehrmeyer SS，Laessig RH.Has compliance with CLIA requirements really improved quality in US clinical laboratories[J].Clin Chim Acta，2004，34(6):37-43.
1 材料與方法
1.1 儀器:采用的儀器是日本Sysmex公司生產(chǎn)的KX-21型全自動血細(xì)胞分析儀。
1.2 試劑 ① 儀器用的稀釋液、清洗液、溶血劑均由日本Sysmex公司提供。② 顯微鏡計(jì)數(shù)用的血小板稀釋液按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第二版）配制，冰箱保存。 ③EDTA-K2抗凝劑
1.3 標(biāo)本來源 選自2008年1月-2008年12月本院門診及住院的血小板結(jié)果異常的血標(biāo)本共207例，另挑選血小板結(jié)果正常的血100作對照。
1.4 用EDTA-K2抗凝全血2ml，充分混勻后，2小時(shí)內(nèi)KX-21型全自動血細(xì)胞分析儀檢測，取血小板檢測結(jié)果異常的血標(biāo)本，同時(shí)用顯微鏡手工計(jì)數(shù)，另取血小板檢測結(jié)果正常的血標(biāo)本100例同時(shí)用顯微鏡手工計(jì)數(shù)，比較兩法結(jié)果。
2 結(jié)果
血小板少于100×109／L的血標(biāo)本121例，為A組；血小板大于300×109／L的血標(biāo)本86例，為B組；lind板在100~300×109／L的血標(biāo)本100例，為C組，其兩法測定結(jié)果如表1所示。
3 討論
3.1 在Sysmex X-21型全自動血細(xì)胞分析儀檢測中，由于紅細(xì)胞和血小板的計(jì)數(shù)是在同一通道中進(jìn)行，且它們之間僅以體積大小來區(qū)別，因此，血小板的計(jì)數(shù)易受小紅細(xì)胞數(shù)量或紅細(xì)胞碎片的影響，由于血液中小紅細(xì)胞的數(shù)量遠(yuǎn)大于血小板數(shù)量，即使有少量的小紅細(xì)胞混入血小板計(jì)數(shù)范圍內(nèi)，也會對血小板計(jì)數(shù)造成很大的影響。在血小板直方圖右側(cè)下降后繼而抬高呈駝峰樣改變，血片油鏡檢查顯示紅細(xì)胞較小或紅細(xì)胞碎片較多，兩種方法血小板計(jì)數(shù)結(jié)果比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）.
3.2 由于血小板的特點(diǎn)易于粘附、聚集。李永紅等認(rèn)為采血是否順利是造成血小板偏低的的一個(gè)重要原因。采血過程中因操作緩慢，穿刺不順且組織受損后，組織凝血因子易混入血標(biāo)本，混勻不及時(shí)等均可促成血小板聚集，從而產(chǎn)生肉眼看不見的小凝塊，這是血細(xì)胞分析儀測定血小板結(jié)果偏低的常見原因之一。這時(shí)血片鏡檢可見血小板聚集成堆。遇到這種情況應(yīng)重新采血測定。
3.3 某些血液病可造成血小板數(shù)真正減少，如骨髓巨核細(xì)胞生成不良（如障）；血小板破壞增加（如DIC、IPT）;血小板分布異常（如脾大）等。
3.4 標(biāo)本放置時(shí)間過長、試劑質(zhì)量、地線、電源和藥物等因素均能對血小板的計(jì)數(shù)造成一定程度的影響，因此檢測過程中應(yīng)盡可能排除各種因素的干擾，以使血小板計(jì)數(shù)可靠，為臨床診斷治療提供有參考意義的數(shù)據(jù)。
參考文獻(xiàn)
［1］ 趙紅燕.血液細(xì)胞儀測定血小板計(jì)數(shù)結(jié)果的分析.上海醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1998.1.3（2）：27
［2］ 陳夢珍。血細(xì)胞分析儀測定血小板影響因素的探討。江西醫(yī)學(xué)學(xué)報(bào)，2005,23（3）:243-244
［3］ 詹靈凌，秦雪、林發(fā)全等。血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的影響因素分析與糾正，廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2004.21（5）:763-764。
1.1 每日保養(yǎng)
日常工作完畢，應(yīng)進(jìn)行一次“清洗設(shè)備”。如果標(biāo)本量大時(shí)，可設(shè)置100次自動清洗一次儀器；可在主界面點(diǎn)擊“設(shè)置”“自動清洗設(shè)備”，當(dāng)儀器測試到設(shè)定的次數(shù)，儀器會自動執(zhí)行清洗設(shè)備。
1.2 每周保養(yǎng)
每周進(jìn)行一次“清洗液浸泡”白細(xì)胞池、紅細(xì)胞池、DIFF池。
1.3 每月保養(yǎng) 為了避免采樣部件受到污染而干擾計(jì)數(shù)結(jié)果，用蘸有酒精的棉簽擦拭吸樣針及拭子上的污漬。血液的采集為真空采血，樣本在測試時(shí)采樣針穿透管蓋時(shí)碎的皮塞會出現(xiàn)管道堵塞，要清洗反沖配合灼燒防止堵孔故障。
2 實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)環(huán)境與衛(wèi)生的保持
由于BF-6800血細(xì)胞分析儀具有激光流式細(xì)胞技術(shù)稱鞘流系統(tǒng)：細(xì)胞經(jīng)鞘流稀釋液作用，單個(gè)排列在流式通道中央，激光進(jìn)行細(xì)胞的光散及光吸收的測定，分析細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，迪瑞DIFF通道實(shí)現(xiàn)了對大量細(xì)胞進(jìn)行依次、準(zhǔn)確、快速的測定，其獨(dú)特的設(shè)計(jì)能夠保證每個(gè)細(xì)胞依次通過鞘流微孔，檢測細(xì)胞體積的測定，在200μs內(nèi)細(xì)胞內(nèi)容物的分析，此檢測裝置能夠有效防止氣泡及靜電的干擾，保證獲得高精度的白細(xì)胞的分類結(jié)果。BF-6800血細(xì)胞分析儀的這種分析原理和特點(diǎn)決定了其對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和衛(wèi)生條件要求較高，否則將對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成不良影響。為此，BF-6800血細(xì)胞分析儀所在實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保持清潔，地面無塵，無雜物，所有的桌椅工作臺面應(yīng)用消毒液擦拭，并且室溫保持在15℃～30℃之間。
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.03.096
SYSMEX KX -21是日本東亞公司生產(chǎn)的三分類血液分析儀，比起以往的手工法血細(xì)胞分析，這種血液細(xì)胞分析儀性能優(yōu)越，每小時(shí)可以檢測60個(gè)標(biāo)本，WBC線性范圍：0～99×109/L。每個(gè)標(biāo)本可提供18個(gè)分析參數(shù)以及細(xì)胞直方圖[1]，極大地提高了臨床血液學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量和工作效率，同時(shí)給臨床鑒別診斷提供了足夠的指標(biāo)。但由于分類計(jì)數(shù)原理等因素，對于血液病的診斷只能起到過篩作用?，F(xiàn)將比對結(jié)果報(bào)告如下。
1 儀器與方法
1.1 儀器 （1）日本原裝SYSMEX KX-21自動全血細(xì)胞分析儀，配套原裝試劑。（2）對照儀器：SYSMEX XS-1000i全血細(xì)胞分析儀以及配套原裝試劑。（3）OLYMPUS顯微鏡：白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。（4）標(biāo)本：EDTA-K2抗凝血。（5）質(zhì)控品：原裝配套質(zhì)控品。
1.2 方法 按正常開機(jī)方式開機(jī)，預(yù)熱穩(wěn)定后，依據(jù)ICSH推薦方法[2]將原裝質(zhì)控品和新制備的新鮮抗凝血標(biāo)本在3 h內(nèi)進(jìn)行兩臺全血細(xì)胞分析儀分別上機(jī)測試[3]。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
2 評價(jià)指標(biāo)與結(jié)果分析
2.1 精密度 依據(jù)ICSH推薦的血液分析儀評價(jià)方案進(jìn)行精密度分析，取EDTA-K2抗凝新鮮全血樣本1份用SYSMEX KX-21和SYSMEX XS-1000i血液分析儀做全血模式分別測量11次，取2～10次（第1次棄去）測定值，獲得5項(xiàng)血細(xì)胞參數(shù)，分別計(jì)算精密度（CV值）。見表1。
【摘要】 目的 目前在縣以下地區(qū)使用三分類全血細(xì)胞分析儀的醫(yī)院很多，現(xiàn)就校對后的SYSMEX KX-21全血細(xì)胞分析儀其中WBC總數(shù)進(jìn)行主要的性能評價(jià)。方法 對SYSMEX KX-21分別進(jìn)行精密度、總重復(fù)性、線性范圍、儀器與人工白細(xì)胞分類比較，并與SYSMEX XS-1000i全血細(xì)胞分析儀作可比性測定。結(jié)果 精密度：RBC、HGB、WBC、PLT、HCT的CV均
【關(guān)鍵詞】 全血細(xì)胞分析儀精密度； 總重復(fù)性； 線性范圍； 分類計(jì)數(shù)
doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.03.096
SYSMEX KX -21是日本東亞公司生產(chǎn)的三分類血液分析儀，比起以往的手工法血細(xì)胞分析，這種血液細(xì)胞分析儀性能優(yōu)越，每小時(shí)可以檢測60個(gè)標(biāo)本，WBC線性范圍：0～99×109/L。每個(gè)標(biāo)本可提供18個(gè)分析參數(shù)以及細(xì)胞直方圖[1]，極大地提高了臨床血液學(xué)檢驗(yàn)的質(zhì)量和工作效率，同時(shí)給臨床鑒別診斷提供了足夠的指標(biāo)。但由于分類計(jì)數(shù)原理等因素，對于血液病的診斷只能起到過篩作用?，F(xiàn)將比對結(jié)果報(bào)告如下。
1 儀器與方法
1.1 儀器 （1）日本原裝SYSMEX KX-21自動全血細(xì)胞分析儀，配套原裝試劑。（2）對照儀器：SYSMEX XS-1000i全血細(xì)胞分析儀以及配套原裝試劑。（3）OLYMPUS顯微鏡：白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)。（4）標(biāo)本：EDTA-K2抗凝血。（5）質(zhì)控品：原裝配套質(zhì)控品。
1.2 方法 按正常開機(jī)方式開機(jī)，預(yù)熱穩(wěn)定后，依據(jù)ICSH推薦方法[2]將原裝質(zhì)控品和新制備的新鮮抗凝血標(biāo)本在3 h內(nèi)進(jìn)行兩臺全血細(xì)胞分析儀分別上機(jī)測試[3]。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。
2 評價(jià)指標(biāo)與結(jié)果分析
2.1 精密度 依據(jù)ICSH推薦的血液分析儀評價(jià)方案進(jìn)行精密度分析，取EDTA-K2抗凝新鮮全血樣本1份用SYSMEX KX-21和SYSMEX XS-1000i血液分析儀做全血模式分別測量11次，取2～10次（第1次棄去）測定值，獲得5項(xiàng)血細(xì)胞參數(shù)，分別計(jì)算精密度（CV值）。
2.2 總重復(fù)性 取EDTA-K2抗凝新鮮全血樣本1份標(biāo)本（與精密度測定為同一標(biāo)本），按正常操作在SYSMEX KX-21分析儀上機(jī)連續(xù)測定10次，然后在室溫下放置1 h、3 h，分別再連續(xù)同樣的測試。將均值列表計(jì)算結(jié)果。見表2。
2.3 線性范圍 取WBC在線性范圍內(nèi)標(biāo)本1份，WBC超線性范圍1份分別上機(jī)檢測，線性范圍內(nèi)標(biāo)本再用稀釋液將其80%、60%、40%、20%分別測定2次，SYSMEX KX-21血液分析儀的線性相關(guān)系數(shù)分別為WBC 0.993，RBC 0.990，HGB 0.999，HCT 0.989，PLT 0.991。WBC在線性范圍外的分別1∶100、1∶200、1∶300倍稀釋分別測定3次，其WBC相關(guān)系數(shù)為0.844。
2.4 儀器白細(xì)胞分類和人工分類比較 選50份標(biāo)本，其中WBC總數(shù)>100×109/L3例，其中WBC總數(shù)
3 討論
SYSMEX KX-21是日本東亞公司生產(chǎn)的三分類血液分析儀，其基本性能測試結(jié)果表明：計(jì)數(shù)精密度高，RBC、HGB、WBC、PLT、HCT的CV均
SYSMEX KX-21儀器在線性范圍內(nèi)的計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，但此種儀器的白細(xì)胞分類，只能起到過篩作用。該儀器是一種基層較理想的全血細(xì)胞分析儀。
參 考 文 獻(xiàn)
［1］ 戴澤寧,金紅,謝鑫友.血細(xì)胞分析儀應(yīng)用中鏡檢標(biāo)本篩選條件的探討［J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2004,19（4）:366-367.
［2］ 李影林.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)全書［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社,1996:276-293.
1.材料與方法
1.1儀器
深圳邁瑞公司生產(chǎn)的BC-5500血液分析儀。
1.2試劑
BC-5500專用配套試劑（溶血劑、稀釋液、清洗液）。
1.3其他
校準(zhǔn)物與質(zhì)控液，全血校準(zhǔn)液（由深圳邁瑞公司提供），全血質(zhì)控物（由青海省臨檢中心提供）。
1.4方法
1.4.1按儀器維護(hù)保養(yǎng)要求，對儀器進(jìn)行全面的維護(hù)，經(jīng)常保持微孔的清潔，以保證BC-500在正常條件下批內(nèi)重復(fù)測定變異數(shù)（RCV）在規(guī)定范圍內(nèi)，每次實(shí)驗(yàn)前血液分析儀用全血校準(zhǔn)物校準(zhǔn)儀器后，嚴(yán)格按儀器操作步驟進(jìn)行測試。
1.4.2用含EDTA-K抗凝管，采集120例健康人靜脈血2ml，輕輕混勻后，立即在血液分析儀BC-500上測定3次，然后分別于5、10、20、30、60min各測3次，并用全血質(zhì)控物質(zhì)同步監(jiān)測儀器，分別計(jì)算其均值，按時(shí)間分組，分別利用多樣本均數(shù)間顯著性檢驗(yàn)與配對t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
2.結(jié)果
2.1標(biāo)本自身因素的影響
由于采血過程不順利，過分?jǐn)D壓或未充分與抗凝劑混勻等因素人為造成血小板的凝集，是造成血小板計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確的首要原因。
2.2標(biāo)本放置時(shí)間的影響
WBC在采血后0―30min內(nèi)隨時(shí)間延長其數(shù)量不規(guī)則遞減，組與組之間差異有顯著性（P
2.3血小板聚集分可逆聚集和不可逆聚集
當(dāng)新鮮靜脈血加入EDTA―K2：抗凝瓶混勻后血小板即發(fā)生聚集反應(yīng)，此時(shí)立即進(jìn)行全血細(xì)胞測定，可逆聚集的血小板還沒有解聚，會造成全血細(xì)胞分析結(jié)果誤差。白細(xì)胞不同程度假性升高，直方圖的小細(xì)胞群會出現(xiàn)一個(gè)很高的截距，血小板不同程度的假性降低，直方圖就會出現(xiàn)鋸齒波或尾部抬高。但抗凝血靜置30min后，再進(jìn)行測定，即可消除上述假性結(jié)果。100例靜脈血放置不同時(shí)間各參數(shù)的均值比較可看出60min與30min測定值差異無顯著性（P>0.05），30min與20min測定值差異有顯著性（P
3.討論
BC-5500型血細(xì)胞分析儀計(jì)數(shù)血小板的原理是直接計(jì)數(shù)2―20fl范圍內(nèi)的血小板，根據(jù)正態(tài)分布理論，用電子擬合線擬合0―70fl范圍內(nèi)的血小板數(shù)量作最終報(bào)告結(jié)果，具有雙曲線的血小板直方圖是它的標(biāo)準(zhǔn)結(jié)果，只具有單曲線的血小板直方圖，只要成正態(tài)對數(shù)分布，曲線在20fl范圍內(nèi)有明顯的主峰，其儀器計(jì)數(shù)法與顯微鏡計(jì)數(shù)法較一致，與臨床基本吻合[1]。血小板膜分內(nèi)膜和外膜，外膜圍繞胞質(zhì)形成漿膜，并延伸到胞質(zhì)內(nèi)部并折疊形成開放微小管系統(tǒng)，它是血小板攝取和釋放的通道。質(zhì)膜內(nèi)側(cè)附著許多微絲，其主要成分為肌動蛋白的肌凝蛋白，與微管環(huán)周束共同支持偽足的形成。當(dāng)新鮮靜脈血離體加入EDTA―K抗凝瓶內(nèi)，管壁周圍的全血外環(huán)境及溫度發(fā)生改變，使血小板形態(tài)發(fā)生變化[2]。由于血小板發(fā)生聚集，在阻抗法做血小板計(jì)數(shù)時(shí)，聚集體所產(chǎn)生的脈沖大于儀器預(yù)設(shè)的單一血小板脈沖值，因而就不會計(jì)數(shù)血小板結(jié)果內(nèi)，從而使血小板數(shù)量減少。
故血小板聚集的原因可能有：
（1）抗凝劑EDTA―K2：能使血小板形態(tài)發(fā)生改變。由盤狀變成球狀，從而使可逆聚集血小板的偽足回縮到血小板胞質(zhì)內(nèi)，血小板相互纏繞的偽足就可解除。
（2）可逆聚集的血小板由于形態(tài)有所改變及偽足的形成，增大了血小板表面積，其表面負(fù)電荷相應(yīng)增大，同性電荷的排斥力也就相應(yīng)增強(qiáng)。
（3）溫度升高，分子運(yùn)動速度越快，溫度對可逆聚集血小板解聚的影響尤其在用預(yù)稀釋方法作全血細(xì)胞測定中更為明顯。
（4）溶血劑的加入量、溶血時(shí)間和儀器檢測的清潔度有關(guān)，因此必須保持微孔的清潔，才能保證儀器測定的可靠性。原因：經(jīng)EDTA―K2抗凝的全血標(biāo)本，在采血30min后進(jìn)行全血細(xì)胞分析，可提高結(jié)果的準(zhǔn)確性。但需排除化療、血小板減少性紫癜、白血病及造血系統(tǒng)異常等疾病。血小板形態(tài)不規(guī)則且細(xì)小，任何灰塵和斑點(diǎn)都會影響計(jì)數(shù)。反復(fù)使用的測定管極易引起雜質(zhì)吸附，造成殘余溶血素污染，從而引起PLT計(jì)數(shù)偏高。血細(xì)胞分析儀檢測血小板的準(zhǔn)確性取決于很多因素，環(huán)境、溫度、抗凝劑混合情況以及所有影響電脈沖大小及數(shù)目的因素都會影響正確計(jì)數(shù)。因此，只有正確操作，排除各種干擾，才能使血小板的計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確靠。
1．1方法
1．1．1儀器精密度測定取正常EDTA-K2抗凝新鮮全血一份，分別在每一臺儀器上連續(xù)重復(fù)測定20次，計(jì)算RBC、WBC、HGB、HCT、PLT的均值、標(biāo)準(zhǔn)差(SD)、變異系數(shù)(CV)。
1．1．2比對試驗(yàn)以CD-3700血細(xì)胞分析儀為參考比對儀器(X)。每日檢測8份血清標(biāo)本，將新鮮抗凝全血標(biāo)本按18，81的順序分別在三臺血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行連續(xù)測定，2h內(nèi)完成。連續(xù)測定5d，記錄檢測結(jié)果。
1．2統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用MicrosoftExcel2003和SPSS16．0進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和相關(guān)性統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并給出線性回歸方程Y=bX+a。精密度評價(jià)根據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)方案(CLIA＇88)允許誤差的1/4作為允許誤差，各比對項(xiàng)目的CV值必須滿足:RBC≤1．5%、WBC≤3．5%、HGB≤1．75%、HCT≤1．5%、PLT≤6．25%。以美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)方案(CLIA''''88)能力比對檢驗(yàn)質(zhì)量要求范圍的1/2作為各項(xiàng)目檢測結(jié)果的允許誤差:RBC≤3．0%、WBC≤7．0%、HGB≤3．5%、HCT≤3．0%、PLT≤12．5%［3］。
2結(jié)果
2．1精密度評價(jià)RBC、WBC、HGB、HCT、PLT五個(gè)檢測項(xiàng)目在三臺血細(xì)胞分析儀上精密度均符合要求。見表1。
2．2相關(guān)性和回歸分析試驗(yàn)儀器(Y)與比對儀器(X)測定結(jié)果相關(guān)性見表2。
2．3偏倚評估將各檢測項(xiàng)目的靶值代入相應(yīng)的回歸方程，計(jì)算比較方法與試驗(yàn)方法測定結(jié)果的預(yù)期偏倚和相對偏倚，以CLIA''''88能力比對檢驗(yàn)質(zhì)量要求范圍的1/2為臨床可接受性能的判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果見表3。
3討論
隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展，越來越多的臨床實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)不同檢測儀器，構(gòu)建多種檢測系統(tǒng)，以提高患者標(biāo)本的檢測速度。臨床實(shí)驗(yàn)室內(nèi)同時(shí)擁有2種或2種以上相同或不同的檢測系統(tǒng)已經(jīng)十分普遍。為確保不同儀器檢測同一檢測項(xiàng)目的結(jié)果具有一致性，CAP認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)中要求，試驗(yàn)室每年需要進(jìn)行至少2次儀器比對［4］。另外，考慮到實(shí)驗(yàn)成本的因素，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室每年參加室間質(zhì)量評價(jià)的儀器往往選擇其中一臺常用儀器，其他儀器做好室內(nèi)質(zhì)量控制，通過與參加室間質(zhì)評的儀器做比對，以保證同一標(biāo)本在不同系統(tǒng)檢測時(shí)得到具有可比性的結(jié)果。
1 資料與方法
1.1 臨床資料 2006—2007年用五分類血細(xì)胞分析儀對門診、病房約6萬例進(jìn)行查血液常規(guī)檢查，發(fā)現(xiàn)有異常的做顯微鏡復(fù)查，發(fā)現(xiàn)血液系統(tǒng)疾病136 例。其中急性非淋巴細(xì)胞白血病23 例，急性淋巴細(xì)胞白血病8 例，慢性粒細(xì)胞白血病4 例，多發(fā)性骨髓瘤4 例，巨幼細(xì)胞性貧血35 例，缺鐵型貧血32 例，骨髓增殖性疾病25 例，再生障礙性貧血5 例，他們均為初診患者，并經(jīng)骨髓形態(tài)學(xué)或經(jīng)上級醫(yī)院檢查證實(shí)。其中男63 例，女73 例，年齡15～81歲。
1.2 檢驗(yàn)方法
1.2.1 儀器 COULTER——HmX血細(xì)胞分析儀及配套試劑，全血質(zhì)控液COULTER公司提供。
1.2.2 方法 常規(guī)消毒法采集靜脈血2 mL(嚴(yán)格按儀器操作規(guī)程進(jìn)行，每天隨機(jī)質(zhì)控)。對白細(xì)胞數(shù)量及直方圖異常者涂片做瑞-吉染色，計(jì)數(shù)分類200個(gè)白細(xì)胞，并作形態(tài)觀察。
2 結(jié)
果
結(jié)果見表1。表1 136例血液病的種類和構(gòu)成比血液病名稱ANLLALLCMLMMMgAIDAMDSAA病例數(shù)
3 討
論
五分類自動血液分析儀具有方便、高精度。它是在一個(gè)流式通道內(nèi)，對單個(gè)白細(xì)胞進(jìn)行直接、同時(shí)、三重測量，然后再進(jìn)行三維分析。顯微鏡下觀察的細(xì)胞形態(tài)是細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)，包括細(xì)胞質(zhì)的顏色、細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有無顆粒及顆粒的性質(zhì)、核的形狀、有無核仁等。異常白細(xì)胞直方圖粗略地顯示各類白細(xì)胞細(xì)胞比例或有無明顯異常細(xì)胞出現(xiàn)，手工顯微鏡復(fù)查時(shí)注意這些變化的真正病理意義，而不能僅從白細(xì)胞直方圖的變化來進(jìn)行臨床診斷。堅(jiān)決反對單位使用血細(xì)胞分析儀后，就一律不再作鏡下復(fù)查和分類的錯(cuò)誤傾向［1］。血液分析儀只對典型的血液病作出提示診斷，以便作進(jìn)一步的檢查。如果對儀器的計(jì)數(shù)原理，異常報(bào)警掌握不夠，特別是用不配套的稀釋液、溶血素，造成直方圖不典型，往往忽視血涂片檢查，造成誤診和漏診，而血細(xì)胞的質(zhì)和量異常恰恰是血液病的重要表現(xiàn)。所以，對一些直方圖有異常的患者，一定要鏡檢。本文報(bào)道的136 例血液系統(tǒng)疾病，是從約6 萬例標(biāo)本中篩查出來的，并結(jié)合手工復(fù)檢，經(jīng)骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)證實(shí)。其中血液惡性疾病占陽性比例28.5%，各種類型的貧血占49.3%。骨髓增殖性疾病占18.4%，再障占3.8%，各種貧血接近占一半，可能與人們的飲食習(xí)慣、疾病的本身有關(guān)。惡性白血病的比例也很大，可能與飲食、居住環(huán)境、工作環(huán)境、自身免疫有很大關(guān)系。但如若大意，定會漏診和誤診。血液病特別是白血病的診斷主要依靠MICM(形態(tài)學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、分子生物學(xué))［2］。但在基層工作中，血細(xì)胞分析儀加上形態(tài)學(xué)復(fù)檢和重要的臨床癥狀(出血發(fā)熱、貧血)，可以為血液系統(tǒng)疾病患者做出初步的診斷，使患者得到及時(shí)的治療。
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2012.28.043
隨著科學(xué)技術(shù)的高速發(fā)展，血細(xì)胞分析儀在臨床上得到了普遍應(yīng)用。其速度快、易操作、功能強(qiáng)為臨床提供了不同層次有效的血細(xì)胞參數(shù)，為血細(xì)胞計(jì)數(shù)的篩查方法。但由于其檢測原理的局限性，使結(jié)果易受多種因素影響，血小板結(jié)果偏高是常見的問題。SYSMEX XT-1800i血細(xì)胞分析儀應(yīng)用庫爾特原理，采用電阻抗法進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。當(dāng)體積大小不等的血細(xì)胞通過儀器計(jì)數(shù)小孔時(shí)，引起小孔內(nèi)、外電流和電壓的變化，形成與血細(xì)胞數(shù)量相當(dāng)，體積大小相應(yīng)的脈沖變化，從而間接地區(qū)分出血細(xì)胞。血小板與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)域常有交叉，體積偏小的紅細(xì)胞其脈沖信號可能被視為血小板信號，造成血小板計(jì)數(shù)假性增高[1]。為了解電阻抗法小紅細(xì)胞對血小板計(jì)數(shù)的影響，筆者按紅細(xì)胞平均體積的大小分類，比較電阻抗法與顯微鏡法血小板計(jì)數(shù)的差異，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 選擇2011年5-11月本院門診及住院的180例患者。按MCV大小進(jìn)行分組，第一組MCV 70~81.9 fl，第二組MCV 60~69.9 fl，第三組MCV
1.2 儀器與試劑 血細(xì)胞分析儀：采用日本SYSMEX XT1800i全自動分析儀及原裝配套試劑與質(zhì)控物。手工法：雙目顯微鏡，改良牛鮑計(jì)數(shù)板，試劑為1%草酸銨稀釋液，按全國臨床檢驗(yàn)技術(shù)操作規(guī)程第3版配置[2]。
1.3 檢測方法 在空腹?fàn)顟B(tài)下，抽取患者靜脈血2 ml，加入含EDTA-K2抗凝劑的真空試管中，輕輕搖勻，在2 h內(nèi)檢測完畢。檢測標(biāo)本前，每日用儀器原裝質(zhì)控物做質(zhì)控，保證儀器在控的前提下檢測患者標(biāo)本。儀器檢測標(biāo)本的同時(shí)進(jìn)行顯微鏡計(jì)數(shù)，用毛細(xì)吸管抽取20 μl靜脈血加入0.38 ml草酸銨稀釋液中，搖勻后滴入計(jì)數(shù)板，室溫靜置后，經(jīng)有經(jīng)驗(yàn)的工作人員計(jì)數(shù)兩次取平均值。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 10.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以(x±s)表示，采用t檢驗(yàn)，以P
2 結(jié)果
MCV 70~81.9 fl時(shí)，儀器法與手工法比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。MCV 60~69.9 fl時(shí)，儀器法與手工法比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P
3 討論
血小板檢測是研究凝血與止血功能的重要指標(biāo)之一，也是手術(shù)前必要檢查的項(xiàng)目。臨床上很多疾病都能引起血小板的增高，如慢性粒細(xì)胞性白血病、原發(fā)性血小板增多癥、真性紅細(xì)胞增多癥。一些疾病還可引起血小板反應(yīng)性增高，如急性化膿性感染、大出血、急性溶血、腫瘤等。因此，血小板檢測結(jié)果的可靠性至關(guān)重要。
SYSMEX XT-1800i全自動血細(xì)胞分析儀采用電阻抗原理，根據(jù)顆粒的大小來區(qū)別細(xì)胞，與顆粒的性質(zhì)無關(guān)。紅細(xì)胞和血小板同在一個(gè)檢測通道，儀器把2~30 fl范圍的細(xì)胞判定為血小板，而將25~250 fl范圍的細(xì)胞判定為紅細(xì)胞，因而紅細(xì)胞與血小板之間存在計(jì)數(shù)的交叉區(qū)域。當(dāng)紅細(xì)胞體積正常時(shí)，與血小板體積懸殊很大，不會干擾血小板計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞體積偏小時(shí)，儀器會將小紅細(xì)胞誤認(rèn)為血小板，使血小板假性升高。而且MCV越小，對血小板計(jì)數(shù)影響越大，血小板計(jì)數(shù)假性增高就越多[3]。臨床上最常見的小細(xì)胞性貧血有缺鐵性貧血、地中海性貧血。紅細(xì)胞分布寬度(RDW)是紅細(xì)胞體積異質(zhì)性參數(shù)，反應(yīng)紅細(xì)胞體積大小不一致的程度。MCV 70~81.9 fl，RDW異常時(shí)，小紅細(xì)胞比例增加，血小板假性升高。當(dāng)患者標(biāo)本中的小紅細(xì)胞增多時(shí)，血小板相應(yīng)參數(shù)PDW、P-LCR、PCT不出結(jié)果，儀器報(bào)警提示血小板分布異常，直方圖右側(cè)抬高，不與橫坐標(biāo)重合甚至平行，呈拖尾狀，這是因?yàn)樾〖t細(xì)胞的脈沖被誤認(rèn)為血小板，而體積又比血小板大的原因[4]。
綜上所述，電阻抗法檢測血小板時(shí)，容易受小紅細(xì)胞干擾。在實(shí)際操作過程中，檢驗(yàn)人員應(yīng)掌握儀器的原理，觀察圖形及報(bào)警，出現(xiàn)MCV小于70 fl或MCV在70~81.9 fl之間而RDW大于14.5%時(shí)，應(yīng)及時(shí)顯微鏡復(fù)檢，減少血小板計(jì)數(shù)誤差，提高檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
參考文獻(xiàn)
[1] 胡前平.小紅細(xì)胞對血小板測定的影響[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2006，3(9)：480.
[2] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：136-137.
doi：10.3969/j.issn.1004-7484（s）.2013.09.769 文章編號：1004-7484（2013）-09-5415-02
腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查一直以來采用牛鮑氏計(jì)數(shù)板手工法進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類，該方法要求操作者具有豐富的操作經(jīng)驗(yàn)，易受個(gè)人主觀因素影響，操作繁瑣耗時(shí)，無法滿足臨床大批量標(biāo)本的要求，而且結(jié)果的可靠性和重復(fù)性低，影響臨床醫(yī)師對患者真實(shí)病情的分析。本實(shí)驗(yàn)利用XT-4000i全自動血細(xì)胞分析儀在一般血液分析模式的基礎(chǔ)上增加的體液分析模式對154份腦脊液標(biāo)本進(jìn)行紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類檢測，并與手工法檢測結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析，以探討XT-4000i全自動血細(xì)胞分析儀在腦脊液標(biāo)本檢測中的應(yīng)用。
1 資料與方法
1.1 標(biāo)本來源 本研究，腦脊液標(biāo)本154份均來自住院病人，標(biāo)本采集完畢后及時(shí)送檢，以防細(xì)菌滋生和細(xì)胞自溶等現(xiàn)象，也為避免標(biāo)本凝固，細(xì)胞學(xué)檢測項(xiàng)目統(tǒng)一使用EDTA-K2抗凝真空采血管采集標(biāo)本，同時(shí)采集血常規(guī)標(biāo)本，跟腦脊液標(biāo)本逐一對應(yīng)，也共計(jì)154份。
1.2 儀器與試劑 SysmexXT-4000i血細(xì)胞分析儀及原裝配套試劑、Sysmex質(zhì)控品，OLYMPUSCX22顯微鏡，標(biāo)準(zhǔn)牛鮑氏計(jì)數(shù)板。
1.3 方法
1.3.1 XT-4000i血細(xì)胞分析儀檢測 每天先使用Sysmex質(zhì)控品高、中、低樣品檢測XT-4000i血細(xì)胞分析儀質(zhì)控是否在控，儀器在控的情況下先對血常規(guī)標(biāo)本進(jìn)行檢測，然后進(jìn)入體液檢測模式，待空白檢測合格后取已使用EDTA-K2抗凝混勻的腦脊液標(biāo)本按照XT-4000i全自動血細(xì)胞分析儀說明檢測腦脊液標(biāo)本，分別得出紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類，白細(xì)胞計(jì)數(shù)須扣除采集腦脊液因穿插出血增加的白細(xì)胞數(shù)=外周血白細(xì)胞數(shù)×腦脊液紅細(xì)胞數(shù)/外周血紅細(xì)胞數(shù)。
1.3.2 手工法檢測 按照第三版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》有關(guān)腦脊液的檢查方法，使用標(biāo)準(zhǔn)牛鮑氏計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)腦脊液標(biāo)本的紅細(xì)胞數(shù)、白細(xì)胞數(shù)和白細(xì)胞分類，并扣除采集腦脊液因穿插出血增加的白細(xì)胞數(shù)=外周血白細(xì)胞數(shù)×腦脊液紅細(xì)胞數(shù)/外周血紅細(xì)胞數(shù)。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分別計(jì)算兩種檢測方法得出的紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類的相關(guān)系數(shù)r。
2 結(jié)果
采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件對兩種方法檢測154份腦脊液標(biāo)本進(jìn)行比較，其結(jié)果紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)和白細(xì)胞分類的相關(guān)性r分別為0.969、0.972、0.941，都具有較高的相關(guān)性。
3 討論
Clinical Comparative Study on Abnormal Analysis Results of Blood Cell Analyzer and Blood Smear/YU Wen-hui，LIU Feng-ling，XIA Jun.//Medical Innovation of China，2016，13（18）：058-061
【Abstract】 Objective：The specimen smears were stained by the blood cell analyzer，and the number，form and classification of blood cells were compared to those results of blood cell analyzer to verify if the results of the blood cell analyzer are reliable and accurate.Method：Two thousand specimens of patients showing abnormal blood cell analysis results via the blood cell analyzer admitted from June 2013 to June 2015 were subjected to research and analysis，and such results were subject to analysis and comparison to results determined via blood smear microscope.Result：The number of platelets of patients were higher than that of normal specimen smears，being the same to results of the blood cell analyzer，but the number of partial platelets didn’t coincided with normally lower part，pseudo thrombocytopenia resulted from the aggregation of platelets must be subjected to blood smear detection.The results of RBC volume tested via blood smear microscope were the same to those via blood cell analyzer.Abnormal WBC specimens classified or unclassified were required to subject to blood smear microscopy.Conclusion：Testing results by using of blood cell analyzer are abnormal and not completely reliable，only the comparison of smear staining microscope test results can the disadvantage of the blood cell analyzer failing to correctly identify abnormal cell compositions，accurate and scientific results are obtained finally，decreasing the misdiagnosis probability of patients.
【Key words】 Blood cell analyzer； Blood smear； Clinical comparison
First-author’s address：Liujiang County People’s Hospital，Liujiang 545100，China
doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.18.017
隨著醫(yī)院血細(xì)胞分析的標(biāo)本逐漸增多，與傳統(tǒng)手工檢測方法比較，血細(xì)胞分析儀由于其操作方便、高效、提供參數(shù)較多及準(zhǔn)確，并能夠?qū)δ承┭盒约膊≡\斷與臨床療效提供依據(jù)，因此被臨床廣泛應(yīng)用。最后出現(xiàn)檢驗(yàn)人員對血細(xì)胞分析儀太過依賴，從而對血涂片鏡檢測的忽視，發(fā)生誤診、漏診的現(xiàn)象，對患者診斷治療造成了延誤[1-4]。筆者為探究血細(xì)胞分析儀分析結(jié)果異常和血涂片進(jìn)行對比血涂片鏡檢測的重要性，選取本院2000例涂片標(biāo)本作為研究資料，取得較好效果，現(xiàn)報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 將本院2013年6月-2015年6月接收的通過血細(xì)胞分析儀實(shí)施血細(xì)胞分析結(jié)果出現(xiàn)異常的患者標(biāo)本2000例進(jìn)行研究分析，其中男性標(biāo)本1100例，女性標(biāo)本900例，年齡6～67歲，平均（42.62±1.64）歲。貧血標(biāo)本1200例，即女性血紅蛋白不超過110 g/L，男性不超過120g/L，白細(xì)胞總數(shù)異常、散點(diǎn)圖異常、儀器不分類、分類顯著異常標(biāo)本350例，血小板的數(shù)量有異標(biāo)本450例。
1.2 檢測儀器 儀器：希森美康XN-1000，試劑：XN-1000配套原裝試劑，質(zhì)控品：煙臺卓越，顯微鏡：OLYMPUS（型號：BX51）。
1.3 方法 血細(xì)胞分析儀檢測出現(xiàn)結(jié)果異常的標(biāo)本均與將其血涂片鏡檢測結(jié)果選出兩組進(jìn)行對比分析[5]。其中血細(xì)胞涂片制定嚴(yán)格按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》中相關(guān)操作規(guī)程實(shí)行。
2 結(jié)果
2.1 貧血患者標(biāo)本 其中大細(xì)胞性貧血150例，小細(xì)胞低色素性貧血600例，正細(xì)胞性貧血450例。大細(xì)胞性貧血：紅細(xì)胞的總數(shù)與正常值相比明顯較低，其體積大部分在105～130 fL；其中男女比例無差異，部分患者的血小板數(shù)量比正常值較低，其白細(xì)胞總數(shù)正?；蛘咻^低，在分類之中，其中性分葉核分葉較多。小細(xì)胞低色素性貧血：紅細(xì)胞體積為55～75 fL與正常值82～95 fL比較明顯較低，其紅細(xì)胞數(shù)量正常。小細(xì)胞低色素性貧血主要的人群多為幼兒與中青年，其中幼兒330例，中青年男性150例，女性120例。白細(xì)胞分類與總數(shù)不定，血小板的數(shù)量未減少，大部分有增高。大細(xì)胞性貧血150例與小細(xì)胞低色素性貧血，其紅細(xì)胞體積與其血涂片鏡下檢查的紅細(xì)胞體積均無明顯差異，可不進(jìn)行涂片鏡下檢測。正細(xì)胞性貧血：450例正細(xì)胞性貧血患者標(biāo)本中，其紅細(xì)胞的數(shù)量均較少，體積正常，白細(xì)胞分類與總數(shù)正常，但血小板的數(shù)量未定，涂片染色鏡檢測發(fā)現(xiàn)，紅細(xì)胞3例緡錢狀排列，通過臨床醫(yī)師實(shí)施骨髓穿刺檢測明確診斷為多發(fā)性骨髓瘤。因此對未明原因的貧血標(biāo)本需通過血涂片鏡下檢測，對其紅細(xì)胞形態(tài)鏡下觀察。
2.2 白細(xì)胞分類、總數(shù)異常 在2000例標(biāo)本中，其中350例白細(xì)胞分類、總數(shù)異常。白細(xì)胞總計(jì)數(shù)
6歲患兒1例：其臨床主要表現(xiàn)為上呼吸道感染、發(fā)熱、肺炎支原體檢測呈陽性，紅細(xì)胞體積較小、數(shù)量正常，Hb 100 g/L，血小板100×109/L，淋巴比例約占89%左右，白細(xì)胞總數(shù)處于正常值，通過血涂片檢測大部分是幼稚細(xì)胞，經(jīng)骨髓穿刺診斷為急性淋巴白血病；1例為中年女性：其血小板數(shù)量較低，有輕度貧血，白細(xì)胞的總數(shù)分類正常，單核細(xì)胞有42%，骨髓穿刺明確診斷為急性骨髓白血??；其中6例血細(xì)胞分析儀未分類，白細(xì)胞總數(shù)降低，有輕度的貧血出現(xiàn)，其血小板的數(shù)量明顯減少，經(jīng)骨髓穿刺檢測，明確診斷為白血病。
2.3 血小板異常 450例血小板數(shù)量異常標(biāo)本中，血細(xì)胞儀器分析顯示，血小板的總數(shù)均低于80×109/L，其中直方圖有所異常為300例，血涂片鏡檢測的結(jié)果顯示有50例血小板聚集，散點(diǎn)圖表現(xiàn)為聚集者43例，散點(diǎn)圖7例表現(xiàn)正常，患者均采集末梢血，利用血小板稀釋液進(jìn)行稀釋，與顯微鏡給予計(jì)數(shù)，顯示血小板數(shù)量正常。因此應(yīng)用血細(xì)胞分析儀分析結(jié)果即使散點(diǎn)圖正常、血小板數(shù)量與正常值對比較低，血涂片鏡下檢測也顯示有聚集標(biāo)本，無論散點(diǎn)圖正常與否，只要血小板數(shù)量偏低，則需要給予涂片鏡檢。剩余的標(biāo)本涂片鏡檢顯示結(jié)果均為血小板減少，與血細(xì)胞分析儀分析的結(jié)果一致。血細(xì)胞分析顯示血小板總數(shù)>500×109/L有150例，與涂片鏡檢顯示結(jié)果符合，可不實(shí)施血涂片鏡檢分析。
3 討論
隨著近年來醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，在血液檢測中血細(xì)胞分析儀已經(jīng)成為常規(guī)且必不可少的檢測方法，但由于很多疾病在發(fā)生與發(fā)展的過程中會造成白細(xì)胞數(shù)量與形態(tài)的改善，因此自動化分析技術(shù)在白細(xì)胞數(shù)據(jù)計(jì)算中，其準(zhǔn)確性相對較差，并且血細(xì)胞分析儀對異常細(xì)胞的形態(tài)無法進(jìn)行判斷，如核左移、核右移、中毒顆粒等，且對異常細(xì)胞、周期細(xì)胞也無法進(jìn)行判斷，如幼稚白細(xì)胞等[6-12]。在血小板的檢測中，血細(xì)胞分析儀還會被血小板自身功能狀況所影響，對血小板凝聚出現(xiàn)時(shí)，血細(xì)胞分析儀還會將血小板判斷成其他的細(xì)胞種類，影響正確的檢驗(yàn)結(jié)果[12-14]。所以，臨床檢驗(yàn)工作中，血細(xì)胞分析儀并不能將血涂片鏡檢測全部代替，少數(shù)血液標(biāo)本通過血細(xì)胞分析儀的檢測后，再次給予血涂片分析十分必要[15-17]。
通過以上對比分析顯示，在貧血標(biāo)本中大細(xì)胞性貧血、小細(xì)胞低色素性貧血，通過血涂片鏡檢后其結(jié)果與血細(xì)胞分析儀分析的結(jié)果相同，其中大細(xì)胞性貧血150例，小細(xì)胞低色素性貧血600例（主要的人群多為幼兒與中青年，其中幼兒330例，中青年男性150例，女性120例），正細(xì)胞性貧血450例。未有不相符的情況發(fā)生，貧血標(biāo)本中均屬于良性貧血，可將血涂片鏡下檢測省略[17]。其正細(xì)胞性貧血，涂片鏡檢顯示可見紅細(xì)胞3例緡錢狀排列，合并有不同程度的血小板減少，通過骨髓穿刺明確確診多發(fā)性骨髓瘤，因此正細(xì)胞性貧血需進(jìn)行血涂片鏡檢測，對紅細(xì)胞的排列與形態(tài)進(jìn)行觀察。關(guān)于血小板數(shù)量減少，450例血小板數(shù)量異常標(biāo)本中，血細(xì)胞儀器分析顯示，血小板的總數(shù)均低于80×109/L，其中直方圖有所異常為300例，血涂片鏡檢測的結(jié)果顯示有50例血小板聚集，散點(diǎn)圖表現(xiàn)為聚集者43例，散點(diǎn)圖7例表現(xiàn)正常。少數(shù)血小板減少是假性減少，應(yīng)用血涂片鏡檢可發(fā)現(xiàn)血小板聚集的現(xiàn)象，將末梢血重新采集實(shí)施血小板計(jì)數(shù)，最后結(jié)果顯示正常，散點(diǎn)圖顯示正常血小板數(shù)量比正常值較低，但血涂片鏡檢測也能夠發(fā)現(xiàn)存在聚集的情況，因此不論散點(diǎn)圖正常與否只要血小板數(shù)量低，均必須給予血涂片鏡檢測。導(dǎo)致假性血小板的減少原因較多，其中包括抗凝劑量與質(zhì)，混勻充分與否、采血通暢與否、采血的量等，造成聚集情況占一定的比例，因此在血小板比正常值低的情況下必須給予血涂片鏡檢測。對于白細(xì)胞總數(shù)不高、或低于正常值或明顯高于正常值的標(biāo)本，本次研究中，2000例標(biāo)本中，其中350例白細(xì)胞分類、總數(shù)異常。白細(xì)胞計(jì)數(shù)
綜上所述，應(yīng)用血細(xì)胞分析儀對標(biāo)本進(jìn)行分析，雖然能夠準(zhǔn)確而又快速地對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，但其檢測結(jié)果在異常情況下并不完全可靠，需要給予血涂片復(fù)檢，與其比較分析，結(jié)合患者具體的臨床表現(xiàn)，再參照復(fù)檢血涂片的結(jié)果進(jìn)行準(zhǔn)確分析。通過血涂片鏡檢可對血細(xì)胞分析儀分析的結(jié)果是否可靠、準(zhǔn)確進(jìn)行驗(yàn)證，可避免不必要的誤診、漏診等情況，確保為醫(yī)師提供更準(zhǔn)確、安全的分析結(jié)果。
參考文獻(xiàn)
[1]鄧明鳳，王昌富，黃俊，等.LH755血細(xì)胞分析儀形態(tài)學(xué)報(bào)警信息指導(dǎo)血涂片復(fù)檢的價(jià)值[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2013，34（12）：1594-1596.
[2]林芳輝，劉玲麗，梁鋒，等.三分群血細(xì)胞分析儀檢測后按復(fù)審標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行血涂片復(fù)審的臨床意義[J].海南醫(yī)學(xué)，2011，22（23）：54-56.
[3]李小平，伍啟康，邱志琦，等.血涂片復(fù)審準(zhǔn)則在血細(xì)胞分析儀中的適用性評估[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（5）：432-433.
[4]樂家新，叢玉隆，王海，等.Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)檢規(guī)則的應(yīng)用研究[J].現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，25（1）：30-36.
[5]歐歌，張偉，陳水平，等.血細(xì)胞分析儀異常散點(diǎn)圖對血液病的輔助診斷價(jià)值[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2014，21（4）：442-444.
[6]李瑞珍.SysmexXE-5000血細(xì)胞分析儀血涂片復(fù)查標(biāo)準(zhǔn)的制定及應(yīng)用評價(jià)[J].四川醫(yī)學(xué)，2013，34（10）：1575-1576.
[7]艾紅梅.應(yīng)用國際血涂片鏡檢復(fù)審規(guī)則評估CELL-DYN3700血細(xì)胞分析儀[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（1）：90-91.
[8]趙華，李代渝，林江，等.60例假性血小板減少原因分析[J].重慶醫(yī)學(xué)，2011，40（12）：1207-1208.
[9]肖淑蘭，丁莉，王彩云，等.Sysmex XS-800i血細(xì)胞分析儀白細(xì)胞提示報(bào)警信息可信度的探討與分析[J].中國醫(yī)學(xué)新，2012，9（16）：94-95.
[10]王馥香.三分類血細(xì)胞分析儀檢測中間型細(xì)胞鏡檢的探討[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2010，7（9）：160-161.
[11]唐仕華，何星.血涂片鐵染色在貧血診斷中的應(yīng)用[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2010，7（1）：172.
[12] Xiong W，Ong S H，Lim J H，et al.Automatic Area Classification in Peripheral Blood Smears[J].IEEE Transactions on Biomedical Engineering，2010，57（8）：1982-1990.
[13] Ghosh M，Chakraborty C，Konar A，et al.Development of hedge operator based fuzzy divergence measure and its application in segmentation of chronic myelogenous leukocytes from microscopic image of peripheral blood smear[J].Micron，2014，57（2）：41-55.
[14] Prasad K，Winter J，Bhat U M，et al.Image analysis approach for development of a decision support system for detection of malaria parasites in thin blood smear images[J].Journal of Digital Imaging，2012，25（4）：542-549.
[15] Etienne C L，Granat F，Trumel C，et al.A mycobacterial coinfection in a dog suspected on blood smear[J].Veterinary Clinical Pathology，2013，42（4）：516-521.
[16] Ikegaya S，Tai K，Shigemi H，et al.Fulminant candidemia diagnosed by prompt detection of pseudohyphae in a peripheral blood smear[J].Am J Med Sci，2012，343（5）：419-420.
[17] Lee J，Lee S Y，Yoo S S，et al.Clinical value of whole-blood interferon-gamma assay in patients with suspected pulmonary tuberculosis and AFB smear and polymerase chain reaction-negative bronchial aspirates[J].Diagnostic Microbiology and Infectious Disease，2012，73（3）：252-256.
[18]戴懷玉.血涂片鏡檢在血常規(guī)檢驗(yàn)中的重要性分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2013，11（36）：62.
[19]莫和國，隋洪，陳光輝，等.ISO15189認(rèn)可實(shí)驗(yàn)室血涂片復(fù)審篩選標(biāo)準(zhǔn)的研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011，，8（23）：85-87.
[20]邢俊，顏俊青，宋星宇，等.血細(xì)胞自動化分析后血涂片復(fù)審的現(xiàn)狀、對策與設(shè)想[J].海南醫(yī)學(xué)，2010，21（22）：23-24.
[21]劉喜龍，謝琳瑛.全自動血細(xì)胞分析血涂片復(fù)檢規(guī)則應(yīng)用分析[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2014，11（35）：107-108.
[22]范亞敏，李鳳俠，王曉成，等.應(yīng)用手工法與血細(xì)胞分析儀法對單核細(xì)胞分類結(jié)果的比較[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2011，9（17）：50.
[23]張悅英，蔡潔新.XT-1800i血細(xì)胞分析儀Q-Flag報(bào)警信息與血涂片復(fù)檢的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用及臨床意義[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2014，12（20）：76-78.
1 環(huán)境溫度的干擾
實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫度決定了儀器、試劑以及標(biāo)本的溫度,計(jì)數(shù)時(shí)稀釋液的溫度應(yīng)為( 22±4) ℃ 。當(dāng)稀釋液的溫度低時(shí),紅細(xì)胞溶解后的膜碎片聚集, 粒度分布曲線的平坦段變短,當(dāng)試劑溫度低于18 ℃時(shí)需加熱使用。有些溶血劑在低溫時(shí)可出現(xiàn)結(jié)晶, 并不容易被察覺,很難引起操作者的注意,但在顯微鏡下, 可見到其中懸浮著許多細(xì)小的結(jié)晶,這樣的溶血劑滴入血液中,白細(xì)胞計(jì)數(shù)必然增高。我們基層醫(yī)院地處北方，這種情況在實(shí)際操作中時(shí)有發(fā)生,尤其是在冬季。血細(xì)胞分析儀分析不出稀釋液在低溫時(shí)產(chǎn)生的聚合結(jié)晶，常使分析結(jié)果出現(xiàn)異常。在臨床中可以將溶血劑或稀釋液進(jìn)行加熱，以升高溫度, 消除結(jié)晶。還可加入適量的非離子表面活性劑,從而減輕溶血劑結(jié)晶的發(fā)生。低溫也易激活血小板,引起血小板凝集, 造成血小板計(jì)數(shù)假性降低。
2 抗凝劑的影響
ABX60血液細(xì)胞分析儀檢測EDTA-K2 含量不同的靜脈血,臨床結(jié)果表明EDTA-K2 有效抗凝劑量在1.5~ 6. 0mg/ mL時(shí),不影響分析結(jié)果。自制抗凝瓶EDTA-K2 用量1.5~ 2.2mg/ mL為宜。低于1. 5mg/mL時(shí)抗凝效果欠佳, 出現(xiàn)肉眼不易發(fā)現(xiàn)的凝集,可表現(xiàn)為血小板降低。在采血時(shí)，一般2mL的采血量,其誤差在± 0. 5mL范圍內(nèi)的話比較適宜。血量過多或過少都會對結(jié)果造成影響,血量過多抗凝不充分,會出現(xiàn)凝塊;血量過少, 會導(dǎo)致抗凝劑過濃。筆者分析認(rèn)為，由于血細(xì)胞遇抗凝劑先有一個(gè)短暫的(1~ 2min) 收縮過程, 這是因?yàn)殁涬x子進(jìn)入血漿以后,改變了滲透壓,導(dǎo)致水從細(xì)胞內(nèi)流出所致。隨后細(xì)胞將鉀離子泵進(jìn)膜內(nèi),細(xì)胞又恢復(fù)原態(tài)。絕大部分患者的標(biāo)本這一時(shí)間只需要幾分鐘, 但也有人需要20~ 30 min?？鼓齽┻^濃會延長這個(gè)平衡時(shí)間。
3 標(biāo)本放置時(shí)間的影響
筆者通過觀察總結(jié)，發(fā)現(xiàn)標(biāo)本存放3~ 6 h對多數(shù)血液分析參數(shù)均有不同程度的影響, 主要影響WBC和PLT 結(jié)果。但有部分標(biāo)本在放置的8h內(nèi)大部分參數(shù)沒有顯著改變， 而平均血小板體積、血小板分布寬度、大血小板比率和血小板壓積在2h內(nèi)卻有明顯增高。筆者認(rèn)為，標(biāo)本放置時(shí)間過長會導(dǎo)致細(xì)胞分層, 分層的細(xì)胞會產(chǎn)生不同的代謝物,形成微環(huán)境,此時(shí), 細(xì)胞的體積與其周圍的微環(huán)境相適應(yīng), 重新混勻后需重新建立平衡, 最初的1~ 2min收縮,達(dá)到平衡約需30min。這一現(xiàn)象對血脂較高的標(biāo)本影響更為顯著。
測定時(shí)間對血小板的影響更為顯著,在一定的時(shí)間段內(nèi), 隨著時(shí)間的延長, 抗凝劑與血液充分溶融, 松散聚集的血小板逐步解聚,血小板數(shù)值逐步升高。實(shí)際操作中, 由于急需報(bào)告結(jié)果(尤其是急診標(biāo)本) 而使待測時(shí)間縮短, 往往導(dǎo)致血小板計(jì)數(shù)結(jié)果偏低。
4 生理和病理因素的干擾
在臨床實(shí)踐中,筆者有時(shí)會發(fā)現(xiàn)應(yīng)用血細(xì)胞儀對新生兒血液進(jìn)行分析時(shí),使用正常量溶血劑計(jì)數(shù)白細(xì)胞, 各項(xiàng)結(jié)果與實(shí)際有差異。筆者認(rèn)為, 由于新生兒處于特殊的生理缺氧狀態(tài),其紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白都高( Hb> 200g/ L)。常規(guī)溶血劑用量不能將紅細(xì)胞完全破壞, 加大溶血劑用量, 可以使白細(xì)胞正確分類, 計(jì)數(shù)準(zhǔn)確。因此, 在新生兒血液分析中掌握好溶血劑用量是獲得可靠結(jié)果的關(guān)鍵。
病理因素也可影響血液分析的結(jié)果, 在某些疾病的影響下,當(dāng)平均紅細(xì)胞體積小于70fL時(shí),血小板計(jì)數(shù)假性升高, 這時(shí)需用顯微鏡人工計(jì)數(shù)才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。
